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【摘要】目的 分析支气管镜肺泡灌洗液 GeneXpert MTB/RIF 技术（简称 GeneXpert）、结核分枝杆菌基因（TB-DNA ）扩增检测、 涂片找抗酸杆菌对肺结核的诊断价值，为临床上明确疾病诊断提供依据。方法 选取 2021 年 6 月至 2022 年 6 月梅州市人民医院收治的 214 例疑似肺结核患者作为研究对象，所有患者行支气管肺泡灌洗，并行 GeneXpert 、TB-DNA、涂片找抗酸杆菌检测，并以结核分枝杆 菌液体培养结果为金标准，比较三种方法对肺结核的检出情况；计算三种方法诊断肺结核的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值 等诊断效能指标。结果 结核分枝杆菌液体培养结果显示阳性有 147 例， 阴性有 67 例； GeneXpert 、TB-DNA、涂片找抗酸杆菌检测对肺 结核的检出率分别为 93.46% 、73.83% 、45.79%；GeneXpert 诊断肺结核的灵敏度最高，涂片找抗酸杆菌诊断灵敏度最低；GeneXpert 的 诊断特异度最低，涂片找抗酸杆菌的诊断特异度最高（均 P<0.05 ），三种检测方法的阳性预测值、阴性预测值比较，差异均无统计学意 义（均P>0.05 ）。 结论 三种检测方法均能有效诊断肺结核，且各有优势，临床需要结合患者的实际情况，酌情考虑多种检测方法的使 用，以提高肺结核特别是耐药结核的早期诊断的准确率。
【关键词】肺结核; 结核分枝杆菌; 传染病; 干酪样坏死; 支气管镜; 肺泡灌洗液
肺结核是由结核分枝杆菌引起的一种传染病，患者常 伴有咳嗽、咳痰、胸痛、乏力、发热等症状。肺结核具有 较强的传染性，且病程时间较长，因此现阶段对于肺结核 的预防控制和检出工作仍十分重要 [1]。GeneXpert MTB/RIF 技术（以下简称 GeneXpert）是一种新型的结核分枝杆菌 检测技术，可对结核分枝杆菌的 rpoB 基因突变性进行检 测，且操作简单，用时少，现在临床得到广泛应用 [2] ；结 核分枝杆菌基因（TB-DNA）扩增检测是一种基于实时荧 光聚合酶链式反应（PCR）技术的结核分枝杆菌脱氧核糖 核酸（DNA）检测方法，与 GeneXpert 类似可快速准确地 诊断肺结核 [3] ；而涂片找抗酸杆菌是传统的显微镜检测方 法，是通过染色后在显微镜下观察痰液中的抗酸杆菌 [4]。 以上三种检测方式是临床上常用的肺结核检测方法，但是 每种方法都各有优势与劣势，故而本研究旨在对比分析支 气管镜肺泡灌洗液 GeneXpert、TB-DNA、涂片找抗酸杆菌 对肺结核的诊断价值，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取 2021 年 6 月至 2022 年 6 月梅州市人 民医院收治的 214 例疑似肺结核患者作为研究对象，其中 男性患者 178 例，女性患者 36 例；年龄 14~75 岁，平均 （44.60±18.25）岁。纳入标准：①患者出现长期咳嗽（超过两周）、咳痰、咳血或呼吸困难等呼吸系统症状；②胸 部 X 线、CT 或其他影像学检查显示肺部结节、阴影、空 洞、浸润或其他异常改变；③患者肺部组织活检或刷片检 查发现结核分枝杆菌或典型的干酪样坏死组织；④均行支 气管镜肺泡灌洗；⑤所有患者行 GeneXpert、TB-DNA、涂 片找抗酸杆菌检测，⑥首次入院检查，此前未接受过相关 治疗。排除标准：①合并严重基础疾病或严重外伤；②合 并恶性肿瘤或其他部位结核；③依从性差或因身体原因等 无法配合完成研究；④既往有结核病史或肺部手术史。本 研究经梅州市人民医院医学伦理委员会审核并通过，所有 患者均知晓并签署知情同意书。
1.2 检测方法
1.2.1 支气管镜肺泡灌洗 患者入院后先进行心电图、凝 血功能、血常规等常规检查，充分了解患者既往病史及疾 病身体状况等情况后禁食水 4 h，患者取平卧位，采用 2% 盐酸利多卡因注射液（石药银湖制药有限公司，国药准字 H14024045，规格： 5 mL ∶0.1 g）局部麻醉后从口腔将支 气管镜（上海澳华内镜股份有限公司，型号：BBF-4）放入 气管，对双侧气道行局部麻醉，通过配套显示屏观察，根 据需求在病变部位取活检组织、刷检，然后取 80~100 mL 生理盐水灌入支气管及病变部位，灌洗后负压吸引回收洗 液，留取适量洗液送检。
1.2.2 GeneXpert 检测 取 1 mL 支气管镜肺泡灌洗标本 放入预处理管中，然后加入液化液； 15~20 min 后将混合 液 2 mL 放入反应盒，采用结核分枝杆菌复合群核酸检测 试剂盒（PCR- 荧光探针法）（广州达安基因股份有限公 司，规格：单管单人份， 20 人份 / 盒）和荧光 PCR 检测系 统（杭州博日科技有限公司，型号：FQD-48A），行扩增检 测，应用全自动医用 PCR 分析系统（美国赛沛公司，型 号：GX-XVI R2）进行自动化检测并报告结果。扩增曲线 呈 S 型，根据 Ct 值和扩增曲线判断（Ct 值 >10 Hu 为阳 性， ≤ 10 Hu 为阴性）。
1.2.3 TB-DNA 检测 取 1 mL 支气管镜肺泡灌洗标本， 4% 氢氧化钠溶液稀释液化摇匀后静置 30 min，离心（转 速 3 000 r/min，时间 10 min）用于基因扩增。应用实时荧 光定量 PCR 技术检测标本中 TB-DNA。实验步骤及结果 判读严格按照试剂盒上的说明书实施操作，同时做好室内 质量控制。
1.2.4 涂片找抗酸杆菌检测 取新鲜灌洗液，离心（转速 3 000 r/min，时间 10 min），取下层浓缩液或沉淀涂片，若 表面为活检组织则通过匀浆后取匀浆液涂片，涂片后紫外 线照射 30 min 进行固定，萋- 尼法染色后在 10× 100 倍镜 下观察标本。
1.3 观察指标 ①比较三种检测方式下肺结核阳性检出 情况。对比 GeneXpert、TB-DNA、涂片找抗酸杆菌等方 式的阳性及阴性检出率。②比较三种检测方式对肺结核 的诊断效能。以结核分枝杆菌液体培养结果为金标准， 对比 GeneXpert、TB-DNA、涂片找抗酸杆菌等方式检测 诊断肺结核的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测 值。阳性预测值 =[ 真阳性数量 /（真阳性数量 + 假阳性数 量）]× 100% ；阴性预测值 =[ 真阴性数量 /（真阴性数量 + 假阴性数量）]× 100% ；特异度 =[ 真阴性数量 /（真阴性数 量 + 假阳性数量）]× 100% ；灵敏度 =[ 真阳性数量 /（真阳 性数量 + 假阴性数量）]× 100%。
1.4 统计学方法 采用 SPSS 20.0 统计学软件分析本研究 所有数据，计数资料以 [ 例 (%)] 表示，两组间比较用 χ2 检验，3 组间比较行χ2 趋势检验。以P<0.05 为差异有统计 学意义。
2 结果
2.1 GeneXpert 对肺结核检出情况 结核分枝杆菌液体 培养结果阳性有 147 例，阴性有 67例；GeneXpert 诊断肺结核的检出率为阳性 93.46%、阴性 6.54%，见表 1。
2.2 TB-DNA 对肺结核检出情况 结核分枝杆菌液体培 养结果阳性有 147 例，阴性有 67例；TB-DNA 检测诊断肺 结核的检出率分别为阳性 73.83%、阴性 26.17%，见表 2。
2.3 涂片找抗酸杆菌对肺结核检出情况 结核分枝杆菌 液体培养结果阳性有 147 例，阴性有 67例；涂片找抗酸 杆菌检测诊断肺结核的检出率分别为阳性 45.79%、阴性 54.21%，见表 3。
2.4 三种方法诊断肺结核诊断效能比较 GeneXpert 诊断 肺结核的灵敏度最高，涂片找抗酸杆菌最低；GeneXpert 特异度最低，涂片找抗酸杆菌最高，差异均有统计学意义 （均 P<0.05 ）；三种检测方法的阳性预测值、阴性预测值 比较，差异均无统计学意义（均P>0.05），见表 4。
3 讨论
肺结核是国内最常见的传染病之一，是目前最严峻的 公共卫生问题之一，防治肺结核是医护人员的重要工作内 容[5]。尽管医疗技术日益发达，肺结核的治疗效果也有了明 显改善，死亡率和致残率大幅度降低，治疗后患者生活质 量明显提高，但是我国人口基数大，绝对患病人数和新发 病例数都较大，因此对肺结核的防治工作仍旧不能松懈。 患者感染肺结核后早期大多无临床表现，少数患者会出现 咳嗽、咳痰等症状，随着疾病发展或机体免疫力降低时才 会出现明显症状，若不及时治疗可出现典型病变，包括发 热、咯血、咳嗽、乏力、结核结节、干酪样坏死等，影响 患者预后[6]。因此需要广泛开展结核病的筛查工作，对早期 患者进行准确的诊断，这样有助于保护患者及公众健康， 尽可能减少疾病的伤害，提高治疗效果。
支气管肺泡灌洗是肺部疾病诊断和治疗中常用的方 法，常用生理盐水通过支气管镜的辅助灌入支气管肺泡中， 再将液体排出，进而达到清洁气道，标本取材及治疗的目 的 [7] 。灌洗液可用于临床上常见的生化、免疫、微生物、 细胞学等检查，应用十分广泛。
GeneXpert、TB-DNA、涂片找抗酸杆菌检测是目前临 床应用较多的肺结核筛查和诊断措施。每种检测方法各有 优缺点，部分医护人员尚不明确这几种检测方法在诊断肺 结核中的价值，因此开展本次研究，探索这几种方法对肺结 核的诊断效能。本研究结果显示，结核分枝杆菌液体培养 结果阳性有 147 例， 阴性有 67 例； GeneXpert、TB-DNA、 涂片找抗酸杆菌检测对肺结核的检出率分别为 93.46%、 73.83%、45.79%，说明 3 种方法均对肺结核具有一定的诊 断价值，其中 GeneXpert、TB-DNA 的检出率相对较高， 虽然涂片找抗酸杆菌检测检出率虽然较低，但是作为传统 简单快速的检测方法也是必不可少的。
本研究结果显示，GeneXpert 诊断肺结核的灵敏度最 高，涂片找抗酸杆菌最低；GeneXpert 特异度最低，涂片 找抗酸杆菌最高。分析其原因，GeneXpert 检测技术是一 种以 GeneXpert 系统平台及 PCR 原理为基础的体外诊断 技术，全自动一体化实时定量检测，以利福平耐药 rpoB 基因为靶基因，自动提取 DNA 片段，并扩增其基因的 192bp 片段，以进行检测的技术手段，并检测出结核分枝 杆菌对利福平是否耐药情况；且与传统的培养方法相比， GeneXpert 具有更高的敏感性，并且结果可以在几小时内 得出，这使得 GeneXpert 成为一种快速、准确的肺结核诊 断方法 [8] 。然而，GeneXpert 的成本较高，限制了其在资 源匮乏地区的应用。TB-DNA 可以检测肺结核病原体的 DNA，但是 TB-DNA 在测定中极易因采样、试剂等污染致 使结果出现误差， 而且 TB-DNA 的操作复杂常需要较高水平的实验室设备和技术人员，因此在资源匮乏地区的使用 也受到限制 [9] 。而涂片找抗酸杆菌作为一种常见的快速病 原体检测方法，可以通过染色技术直接观察抗酸杆菌（结 核分枝杆菌）的存在，尽管涂片找抗酸杆菌具有简单、快 速的优点，但其敏感性较低，特别是对于微量感染和难以 培养的菌株 [10] ，因此，涂片找抗酸杆菌常常与其他诊断 方法联合使用，以提高诊断准确性。通过分析后发现，单 一检测虽具有一定优势但具体应用还应根据实际情况酌情 考虑。
综上， GeneXpert 具有较高的灵敏度、涂片找抗酸杆 菌有较高的特异度，TB-DNA 也有着比涂片找抗酸杆菌较 高的检出率和较 GeneXpert 更高的特异度。三种检测方法 均能有效诊断肺结核，且各有优势，临床需要结合患者的 实际情况，酌情考虑多种检测方法的使用，以提高肺结核 特别是耐药结核的早期诊断率。
参考文献
[1] 沈甜 , 朱慧明 , 田华 , 等 . 外周血降钙素原、 C- 反应蛋白、纤维 蛋白原、D- 二聚体水平对肺结核合并细菌性肺炎的早期诊断价 值 [J]. 中国热带医学 , 2023, 23(7): 730-735.
[2] 李幸曼 . 结核分枝杆菌 / 利福平耐药性实时荧光 PCR 检测与抗 酸染色在肺结核中的诊断价值 [J]. 中国当代医药 , 2022, 29(14):146-149.
[3] 何家花 , 余成强 , 李步荣 , 等 . TB-DNA、T-SPOT.TB 和 TB-Ab 平 行检测在肺结核诊断中的应用价值 [J]. 检验医学与临床 , 2021,18(1): 67-69, 72.
[4] 陈桂茹 , 周欣滢 , 黄广荣 . 结核分枝杆菌复合群核酸检测联合痰 涂片找抗酸杆菌检测对诊断肺结核的临床应用价值 [J]. 智慧健 康 , 2022, 8(28): 27-29, 35.
[5] 陈静 . 肺结核疾病的发病原因与护理手段浅析 [J]. 中国科技期刊 数据库医药 , 2021, 3(2): 83-85.
[6] 王燕波 , 胡阳 , 宋宁 , 等 . 支气管镜在菌阴肺结核诊断中应用价 值 [J]. 临床肺科杂志 , 2022, 27(6): 915-918.
[7] 张艳 , 王华 , 侯婧 , 等 . 支气管肺泡灌洗液结核分子生物学检测 与外周血 T 细胞斑点试验对痰涂片阴性肺结核患者的诊断价 值 [J]. 中国医药导报 , 2023, 20(23): 115-118, 124.
[8] 郑永乐 , 王秀英 . GeneXpert 快速诊断肺结核和肺外结核标本 利福平耐药的检测研究 [J]. 中国基层医药 , 2019, 26(21): 2574-2577.
[9] 李素华 , 陈莉 , 王欢 . 荧光定量 PCR 检测 TB-DNA 在各类检样 中的阳性率分析 [J]. 西南国防医药 , 2007, 17(6): 752-753.
[10] 李明瑛 , 姚恒波 , 柴青峰 , 等 . 液基细胞学涂片法检测痰抗酸杆 菌对肺结核的诊断价值 [J]. 新乡医学院学报 , 2019, 36(4): 364-367.
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