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摘要：目的探究雌激素受体β在乳腺癌他莫昔芬内分泌治疗耐药中的作用。方法将erβ细胞株（M/siβ）、erα细胞株（M/siα）、人乳腺癌细胞株erα/erβ（M/HK）作为研究对象，采用Mtt法、半定量转逆录Pcr法来检测乳腺癌细胞对他莫昔芬（taM）的敏感程度及其抗药基因表达程度与er亚型间的关联。结果相比与对照组Mcf-7，M/siα组可有效促进他莫昔芬（taM）的药物表达（P<0.05）；erβ高表达可起到限制Mcf-7细胞抗药基因表达的作用。结论erβ表达程度直接影响到Mcf-7细胞抗药能力。
关键词：雌激素受体β；乳腺癌；他莫昔芬
本文引用格式：冯得财,黄宇康,吴楚成,等.雌激素受体β在乳腺癌他莫昔芬内分泌治疗耐药中的作用分析[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(73):123-124.
0引言
本研究主要探析MCF-7对TAM的耐药能力、耐药基因表达程度与ER亚型间的作用关系，现报道如下。
1资料与方法
1.1细胞株和试剂。本室所保存的人乳腺癌细胞株（MCF-7），本研究的对象为ERβ细胞株（M/siβ）、ERα细胞株（M/siα）、人乳腺癌细胞株ERα/ERβ（M/HK）。主要试剂有噻唑蓝、他莫昔芬、胎牛血清、羊抗小鼠二抗、羊抗兔二抗、磷酸化ERK、磷酸化Akt、活性炭处理过的胎牛血清、发光底物检测试剂、BCA蛋白试剂、抗β-actin抗体、培养基。
1.2方法
（1）采用MTT方法检查各种乳腺癌细胞株对他莫昔芬（TAM）的敏感程度：选取一些生长期的M/siβ、M/siα、M/HK细胞接种在基于96的孔板上，每个孔接种细胞个数为4×103个，放置到温度为37℃、5%的CO2培养基中，培养时间为24 h；之后，置换到1%的胎牛血清（FBS）培养基中，培养24 h，以实现细胞的同步生长。然后，添加不同浓度的TAM，分别为10、5、1、0.5、0.1μmol/L。对照组中添加药物稀释液，每个浓度设置5个复孔。离心处理后，每个孔中添加浓度为0.5 mg/mL的100μlTAM，孵育4 h，待弃上清之后，每个孔中添加100μl二甲亚砜（DMSO）。
（2）运用半定量转逆录PCR来检测各种乳腺癌细胞株的耐药基因表达情况：依据转逆录（TR）试剂要求，对核糖核酸（RNA）进行相应的提取；根据相关要求，进行相应的M-mLV转录酶转录。β-actin、PCR、GST-π、TOPOⅡ、MDR1大小分别为158、240、162、180、133。PCR反应体系：上下游引物均为10 pmol，添加双蒸水，直到体积达到20μl，1.0μlcDNA，1.0μlTap；PCR的反应要求：预变形5 min，温度为94℃；变性30 s，温度为94℃；退火45s，温度为59℃；延伸1min，温度为72℃，总34个循环；10 min延伸，温度为72℃。
1.3观察指标。①观察乳MCF-7的TAM耐药能力与ER亚型之间的影响关系。②观察MCF-7细胞中的耐药基因与ER亚型之间的作用关系。
1.4统计学分析。用SPSS 20.0分析数据，计量资料（±s）、计数资料行t检验、χ2检验对比。P<0.05为差异显著。
2 结果
2.1MCF-7细胞的TAM耐药能力与ER亚型之间的作用关系。不同浓度的TAM（10、5、1、0.5、0.1μmol/L）对4株乳腺癌细胞皆具有抑制效果，但所达到的抑制程度不尽相同。相比与MCF-7，M/HK组不存在明显差异（P>0.05）；M/siα组（ERβ高表达）伴随TAM的增加，其抑制效果较为明显，抑制率分别为（45.76±1.62）%:（24.56±1.13）%、（58.34±1.59）%：（31.56±1.64）%、（59.36±1.27）%：（37.24±1.65）%，P<0.05，这说明ERβ高表达可有效提高TAM对乳腺癌细胞增长的抑制作用，即增加MCF-7细胞对TAM的敏感程度；当TAM浓度达到10μmol/L时，M/siβ组（ERα高表达）TAM对细胞抑制的能力明显下降，细胞抑制率为（22.34±1.36）%：（38.01±1.42）%，这说明ERα高表达可限制TAM对细胞的抑制作用，即提高细胞的TAM耐药能力。
2.2MCF-7细胞中的耐药基因与ER亚型之间的作用关系。半定量转逆录PCR检测结果显示，M/HK组与对照组的MCF-7对细胞中4种耐药基因表达程度无明显差异（P>0.05）；M/siα组（ERβ高表达）的LRP、TOPOⅡ、MDRI、mRNA表达程度有所降低[（0.42±0.33）：（0.92±0.81）、（0.24±0.01）：（0.38±0.05）、（0.48±0.03）：
（0.57±0.04），P均<0.05]；而M/siβ组（ERα高表达）细胞耐药基因表达程度则有所增加[（0.84±0.07）：
（0.59±0.03）、（1.13±0.09）：（0.94±0.07）、（0.52±0.01）：（0.38±0.02），P均<0.05]，这说明了ERα/ERβ表达在一定程度上可影响LRP、MDPI基因转录水平。该组研究结果表示ERβ表达程度和MCF-7细胞耐药基因mMRN转录水平呈现正比例关系；而ERα则与其呈现反比例关系。
3讨论
目前，拮抗ER内分泌疗法是治疗乳腺癌的主要手段，其中，代表性药物为雌激素的相似物TAM。临床研究表示[1]，乳腺癌患者在使用TAM后，基于ERα阳性乳腺癌患者的治疗质量要明显好于基于ERα阴性乳腺癌患者。体验实验表示[2]，TAM可有效抑制乳腺癌细胞增长。
有关研究发现[3]，当MCF-7细胞同时表达ERβ、ERα蛋白时，其主要以ERα表达为主；细胞株对照质粒阴性M/HK细胞，其ERβ、ERα蛋白表达程度与MCF-7表达效果极为相像。乳腺癌患者在进行内分泌治疗中，会产生耐药问题，这严重影响着治疗效果，而耐药问题与ERβ存在着一定的联系，但临床上尚未明确指出ERβ在其中的作用。有关研究表示[4]，部分ERα阴性乳腺癌患者可表达出ERβ，并且所表达的ERβ程度与临床预后呈现负相关关系。此外，也有研究表示[5]，一些ERα阳性乳腺癌患者治疗后，其与ERα阴性患者相比，肿瘤复发几率较低，这与本研究的结果相一致。本研究中，TAM可有效抑制表达较高的ERβ乳腺癌细胞，ERα则可限制TAM对细胞增长的抑制作用，这充分体现出了ERβ在乳腺癌他莫昔芬内分泌治疗耐药中起到积极作用。有关研究表示[6]，ERβ可调借活性氧，提高肿瘤细胞凋亡速度，有效解释了TAM可对基于ERβ高表达的乳腺癌细胞增长具有较强的抑制作用。本次研究结果表示，ERα可影响TAM对细胞增长的抑制能力，ERβ可促进细胞耐药基因的表达。
总而言之，ERβ可增加TAM对乳腺癌细胞增长的抑制能力，与细胞耐药基因表达程度呈现负相关关系。
参考文献
[1]朱丽喆,李雄雄,任予.托瑞米芬与他莫昔芬在乳腺癌内分泌治疗的临床进展[J].中华普通外科学文献(电子版),2017,11(3):204-207.
[2]王建逵,李明,杨晓娟,等.他莫昔芬对乳腺癌患者的雌激素受体α36的增强转移作用[J].中国临床药理学杂志,2018,263(9):36-38.
[3]谭文彬,陆靖,杜峰,等.雌激素受体在MCF-7乳腺癌细胞对他莫昔芬耐药中的作用[J].中国热带医学,2017,17(1):47-49.
[4]朱余兵,赵拯,刘赟心.他莫昔芬及其代谢产物血药浓度与ER阳性乳腺癌患者子宫内膜增生的相关性研究[J].中国药房,2017,28(20):2768-2771.
[5]王建逵,李明,杨晓娟,等.他莫昔芬对乳腺癌患者的雌激素受体α36的增强转移作用[J].中国临床药理学杂志,2018,263(9):1042-1044.
[6]吴磊,胡海峰,王丽娟,等.Gαs在乳腺癌他莫昔芬耐药中的作用[J].现代肿瘤医学,2017,25(13):2035-2038.
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