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【摘要】 目的：分析血清热休克蛋白90(HSP90)、可溶性程序性死亡受体 1(sPD-1)、可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(suPAR) 水平联合检测在原发性肾病综合征(PNS)发作期患儿诊断中的效能。方法： 回顾性分析 2020 年 5 月至 2022 年 5 月该院收治的 80 例 PNS 患儿的临床资料，根据疾病活动度将其分为发作期组(n=40)、缓解期组( n=40)，另选取同期 40 名健康体检儿童作为对照组。比较三 组血清 HSP90、sPD-1、suPAR 水平， 采用 Spearman 相关性分析血清 HSP90、sPD-1、suPAR 水平与疾病活动度的相关性， 绘制受试者 工作特征曲线(ROC)分析血清 HSP90、sPD-1、suPAR 水平单项及联合检测诊断 PNS 患儿发作期的效能。结果： 发作期组血清 HSP90、 sPD-1、suPAR 水平均高于缓解期组和对照组，且缓解期组高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05);Spearman 相关性分析结果显示， 血清 HSP90、sPD-1、suPAR 水平与疾病活动度均呈正相关( r>0. P<0.05);ROC 曲线分析结果显示， 血清 HSP90、sPD-1、suPAR 水平 单项及联合检测诊断 PNS 发作期患儿的曲线下面积分别为 0.725、0.625、0.675、0.875.均具有一定诊断效能，且联合检测诊断效能最佳。 结论： 血清 HSP90、sPD-1、suPAR 水平联合检测诊断 PNS 发作期患儿的效能均高于三者单项检测。
【关键词】 血清热休克蛋白90,可溶性程序性死亡受体1,可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体,原发性肾病综合征,检测,诊断
Efficiency of combined detection of serum HSP90. sPD-1 and suPAR levelsindiagnosisof children with primary nephrotic syndrome in attack period
WANG Shujing
(Department of Pediatrics of Puyang Oilfield General Hospital, Puyang 457001 Henan, China)
【Abstract】 Objective:To analyze efficiency of combined detection of serum heat shock protein 90 (HSP90), soluble programmed death receptor 1 (sPD-1) and soluble urokinase-type plasminogen activator receptor (suPAR) levels in diagnosis of children with primary nephrotic syndrome (PNS) in attack period. Methods:The clinical data of 80 children with PNS admitted to this hospital from May 2020 to May 2022 were retrospectively analyzed. According to the disease activity, they were divided into attack group (n=40) and remission group (n=40). Another 40 healthy children in the same period were selected as the control group. The levels of serum HSP90. sPD-1 and suPAR were compared among the three groups. Using Spearman correlation analysis to investigate the correlation between HSP90. sPD-1. suPAR and disease activity. The receiver operating characteristic curve (ROC) was drawn to analyze the efficiencies of single and combined detection of HSP90. sPD-1 and suPAR levels in the diagnosis of onset in children with PNS in the attack period. Results:The levels of serum HSP90. sPD-1 and suPAR in the attack group were higher than those in the remission group, those in the remission group were higher than those in the control group, and the differences were statistically significant (P<0.05). The Spearman correlation analysis showed that the serum HSP90. sPD-1. suPAR levels were positively correlated with the disease activity (r>0. P<0.05). The ROC curve showed that the areas under the curve of single and combined detection of serum HSP90. sPD-1 and suPAR levels in the diagnosis of children with PNS in the attack period were 0.725. 0.625. 0.675 and 0.875. separately, all of which had certain diagnostic efficiencies, and the combined detection had the highest diagnostic efficiency. Conclusions:The efficiency of combined detection of serum HSP90. sPD-1 and suPAR levels in the diagnosis of children with PNS in the attack period is higher than that of single detection of the three.
【Keywords】 Serum heat shock protein 90; Soluble programmed death receptor 1; Soluble urokinase-type plasminogen activator receptor; Primary nephrotic syndrome; Detection; Diagnosis
原发性肾病综合征(PNS)患儿临床表现为大 量蛋白尿、低蛋白血症及高度水肿等 [1-2]。血清热 休克蛋白 90(HSP90) 是热休克蛋白(HSP) 家族 成员之一，对维护蛋白分子正常折叠、转运、降解等发挥重要作用 [3]。可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(suPAR)能反映机体炎症反应程度及免疫激活状态 [4]。可溶性程序性死亡受体 1(sPD-1)介导信号通路参与肾小球肾炎、红斑狼疮性肾炎等免疫性肾病的发生发展过程 [5]。本文观察 HSP90、sPD-1、suPAR 水平联合检测在 PNS 发作期患儿诊断中的效能。
1 资料与方法
1.1 一般资料 回顾性分析 2020 年 5 月至 2022 年 5 月本院收治的 80 例 PNS 患儿的临床资料。纳入 标准：符合 PNS 相关诊断标准 [6] ;肝功能正常;首 次确诊;临床资料完整。排除标准：免疫功能异常; 合并血液系统疾病;合并心、脑血管疾病;依从性 不佳。根据疾病活动度将其分为发作期组(n=40)、 缓解期组(n=40)。另选取同期 40 名健康体检儿 童作为对照组。发作期组男 26 例，女 14 例;年龄 3~12岁，平均(7.37±2.14)岁;体质量指数(BMI) 17.9~22.5 kg/m2 ，平均(20.22±1.14 )kg/m2 ;疾病 类型：膜性肾病 3 例，局灶性节段性肾小球硬化 11 例， 系膜增生性肾小球肾炎 6 例， 微小病变型 14 例，膜增生性肾小球肾炎 6 例。缓解期组男 25 例， 女15例;年龄 3~13 岁， 平均(7.56±2.24)岁;BMI 17.8~23.6 kg/m2 ，平均(20.43±1.43)kg/m2 ;疾病 类型：膜性肾病 4 例， 系膜增生性肾小球肾炎 7 例， 局灶性节段性肾小球硬化 10 例， 微小病变型 15 例， 膜增生性肾小球肾炎 4 例。对照组：男 20 名，女 20 名;年龄 3~12 岁， 平均( 7.52±2.11)岁;BMI 17.4~23.7 kg/m2 ，平均(20.55±1.55 )kg/m2.三组 一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)， 有 可比性。
1.2 方法 采集所有受试者清晨空腹静脉血 5 mL，3500 r/min，离心半径 10 cm，离心 15 min，留取上层血清。采用酶联免疫吸附法检测血清 HSP90、sPD-1、suPAR 水平，具体操作按照说明书进行，所用试剂盒及检测仪均由美国 R&D 公司提供。
1.3 观察指标 (1)比较三组血清 HSP90、sPD- 1、suPAR 水平。(2) 采用 Spearman 相关性分析 血清 HSP90、sPD-1、suPAR 水平与疾病活动度的 相关性。(3)绘制受试者工作特征(ROC)曲线 分析血清 HSP90、sPD-1、suPAR 水平单项及联合 检测诊断 PNS 发作期患儿的效能。
1.4 统 计 学 方 法 应 用 SPSS 21.0 软 件 进 行 统 计学分析，计量资料以(x±s )表示，采用 t 检 验，计数资料以率(%)表示，采用 χ2 检验，采 用 Spearman 相 关 性 分 析 HSP90、sPD-1、suPAR 水平与疾病活动度的相关性，绘制 ROC 曲线分析 HSP90、sPD-1、suPAR 水平单项及联合检测诊断 发作期 PNS 患儿的价值，以 P<0.05 为差异有统计 学意义。
2 结果
2.1 三 组 血 清 HSP90、sPD-1、suPAR 水 平 比较 发作期组血清 HSP90、sPD-1、suPAR 水平均高于缓解期组、对照组，且缓解期组高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。 见表 1.
2.2 血清 HSP90、sPD-1、suPAR 水平与疾病活动 度的相关性 Spearman 相关性分析结果显示，血清 HSP90、sPD-1、suPAR 水平与疾病活动度均呈正 相关( r>0. P<0.05)。 见表 2.
2.3 血清 HSP90、sPD-1、suPAR 水平单项及联合检测诊断 PNS 发作期患儿的价值 以发作期患儿为阳性标本， 以缓解期患儿为阴性样本， 绘制 ROC曲线结果显示，血清 HSP90、sPD-1、suPAR 水平单项及联合检测诊断 PNS 发作期患儿的曲线下面积(AUC)分别为 0.725、0.625、0.675、0.875. 均具有一定诊断效能，且联合检测诊断效能最佳。见图 1、表 3.
3 讨论
PNS 发病与免疫功能紊乱和伴随的炎症反应密切相关，寻找敏感、便捷、准确的相关血清因子对评估患儿病情程度具有重要意义 [7-8]。HSP 是一种高度保守的伴侣分子，在细胞处于高温、冷缺血、微生物感染或组织创伤等情况下均可大量释放 [9]。 血清 sPD-1 是血清程序性死亡分子(PD-1)的可 溶性形式，为机体重要的免疫抑制分子 [10]。
本研究结果显示， 发作期组血清 HSP90、sPD- 1、suPAR 水平均高于缓解期组、对照组，且缓解 期组高于对照组; 血清 HSP90、sPD-1、suPAR 水 平与疾病活动度均呈正相关。分析原因在于 HSP90 参与核转录因子 κB(NF-κB)的激活过程，调 节炎症反应。在急性肾损伤中，HSP90 可抑制 NF- κB 激活，阻断炎症反应及肾损伤的发展。血 清 sPD-1 作为一种Ⅰ型跨膜糖蛋白，可通过抑制 PD-1 信号通路，导致 T 细胞过度活化，加快疾病 发展 [11]。suPAR 是纤溶系统中的多功能受体，在 机体发生炎症反应时，其水平在血清及尿液中均 升高 [12-13]。本研究 ROC 曲线分析结果显示，血清 HSP90、sPD-1、suPAR 水平单项及联合检测诊断 PNS发作期患儿的AUC分别为0.725、0.625、0.675、 0.875.均具有一定诊断效能，且联合检测诊断效 能最佳。提示血清 HSP90、sPD-1、suPAR 水平联 合检测诊断 PNS 发作期患儿的效能高于三者单项 检测。
综上所述，血清 HSP90、sPD-1、suPAR 水平联合检测诊断 PNS 发作期患儿的效能均高于三者单项检测。
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