改良 HE 染色技术在病理诊断中的应用效果论文

SCI论文（www.lunwensci.com）

　　【摘要】 目的： 探讨改良苏木精 - 伊红(HE) 染色技术在病理诊断中的应用效果。方法： 选取 2021 年 1 月至 2022 年 8 月该院 182 例采用常规 HE 染色技术的病理组织石蜡切片标本为对照组，另选取同期 200 例采用改良 HE 染色技术的病理组织石蜡切片标本为研究 组。比较两组染色标准率、标本合格率和不同组织染色有效率。结果： 研究组染色标准率、标本合格率均高于对照组，差异有统计学意义 ( r<0.05) ;研究组骨组织、脂肪组织、子宫内膜组织、胃镜活检、肝胆组织的染色有效率均高于对照组， 差异有统计学意义(r<0.05) 。 结论： 改良 HE 染色技术应用于病理组织石蜡切片标本诊断可提高染色标准率、标本合格率和不同组织染色有效率，其效果优于常规 HE 染色技术诊断。

　　【 Abstract】 Objective:To observe application effects of modified hematoxylin-eosin (HE) staining technique in pathological diagnosis. Methods:From January 2021 to August 2022. 182 cases of pathological tissue paraffin section specimens with conventional HE staining technique were selected as control group. Another 200 cases of pathological tissue paraffin section specimens with modified HE staining technique were selected as study group. The staining standard rate, the specimen qualified rate, and the staining effective rate of different tissues were compared between the two groups. Results:The staining standard rate and the specimen qualified rate of the study group were higher than those of the control group, and the differences were statistically significant (r<0.05). Further, the staining effective rates of bone tissue, adipose tissue, endometrial tissue, gastroscopy biopsy and hepatobiliary tissue in the study group was higher than that in the control group, and the difference was statistically significant (r<0.05). Conclusions:The modified HE staining technique in the diagnosis of paraffin section specimens of pathological tissues can improve the staining standard rate, the specimen qualified rate of and the staining effective rate of different tissues. Moreover, it is superior to conventional HE staining technique.

　　【Keywords】 Hematoxylineosin; Staining technique; Pathological diagnosis; Paraffin wax; Section; Specimen

　　病理诊断主要是用肉眼观察手术切除的标本的 颜色、形状等，之后由病理科取材、固定、脱水、 浸蜡、包埋、染色，将其做为病理切片，由医生做 出诊断，明确疾病情况。病理诊断具有客观性、准 确性，是诊断多种肿瘤疾病的有效方法 [1-2] 。值得 注意的是，在对病理切片进行上述操作的过程中， 受多种因素的影响，极易出现脱水不完全、固定不 当等不良情况，对染色效果造成不良影响，从而降 低诊断准确率。苏木精 - 伊红(HE)染色技术在 组织学、病理学中应用最广泛，但病理结果与制片 过程中多种因素有关，常规 HE 染色技术在病理诊 断中具有一定局限性，影响诊断结果 [3-4] 。而改良 HE 染色技术是对常规 HE 染色技术的补充和优化， 可最大程度降低客观因素对诊断结果的影响，对提高诊断准确率有积极作用。本文观察改良 HE 染色 技术在病理诊断中的应用效果。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料 选取 2021 年 1 月至 2022 年 8 月 本院 182 例采用常规 HE 染色技术的病理组织石蜡 切片标本为对照组，另选取同期 200 例采用改良 HE 染色技术的病理组织石蜡切片标本为研究组。 对照组男 105 例， 女 77 例; 年龄 32~70 岁， 平均 (52.00±8.68) 岁; 标本类型： 骨组织 46 例， 脂 肪组织 38 例， 子宫内膜组织 32 例， 胃镜活检 35 例， 肝胆组织 31 例。研究组男 118 例，女 82 例;年龄 33~70 岁， 平均(51.50±8.65) 岁; 标本类型： 骨 组织 48 例，脂肪组织 44 例，子宫内膜组织 40 例， 胃镜活检 36 例，肝胆组织 32 例。两组一般资料比 较，差异无统计学意义(r>0.05)，有可比性。

　　1.2 方法

　　1.2.1 主要试剂与仪器 浸蜡脱蜡透明液(南昌雨露实验器材有限公司) ，无水乙醇(中海源化工有 限公司) ，95% 乙醇及 75% 乙醇(东莞润庆化工 公司) ，苏木素(成都彼样生物科技有限公司)， 伊红(北京百奥莱博科技有限公司) ，盐酸(郑州 龙达化工产品有限公司)。石蜡切片机(上海聚慕 医疗器械有限公司，型号：徕卡 RM2245 型) ，正 置显微成像系统(上海赖氏电子科技有限公司，型 号：BX43+DP26 型)。

　　1.2.2 常规 HE 染色技术 对照组采用常规 HE 染色 技术， 将固定后的病理组织块经浸蜡、包埋、切片、 脱蜡、透明后，依次用无水乙醇、95% 乙醇、75% 乙醇进行 3~5 min 入水，蒸馏水清洗持续 1 min，苏 木素染色。苏木素液配制：苏木素 2.5 g、无水酒精 25 mL、硫酸铝钾 50 g、蒸馏水 500 mL、黄色氧化 汞 1.25 g、冰醋酸 20 mL。染色时间应超过 5 min， 蒸馏水清洗 1 min，1% 盐酸乙醇溶液分化 10~20 s， 蒸馏水清洗 10~20 s，显微镜下观察切片标本，若 细胞核呈蓝色即为细胞核染色成功。之后切片标本 用 1% 伊红染色 10~20 s， 蒸馏水清洗 1 min 左右， 依次用 75% 乙醇、95% 乙醇、无水乙醇对切片进 行 3~5 min 脱水， 中性树胶封片。准确标记病理号 及相关信息。

　　1.2.3 改良 HE 染色技术 研究组采用改良 HE 染 色技术，依据病理组织特点，选择与之对应的固定 时间、脱水时间。于固定液中放置病理组织以使蛋 白质凝固，最大程度保持细胞组织结构。以二甲苯 进行去蜡处理，再进行水洗、不同浓度酒精清洗， 之后进行苏木素液染色。苏木素液配制：苏木色精 2 g、硫酸铝 5 g、碘酸钾 0.2 g、95% 乙醇 250 mL、 蒸馏水 750 mL、丙三醇 50 mL、柠檬酸 0.3g。将硫 酸铝溶于蒸馏水中为饱和 A 液， 将苏木素溶于乙醇 为 B 液，A 与 B 混合均匀，加入氧化剂碘酸钾，摇匀，放置 5 min，再一次加入丙三醇、柠檬酸，充 分震荡后放置。对于小体量标本，适当缩短固定、 脱水的时间;对于大体量标本如脂肪组织，适当延 长固定、脱水的时间;染色期间密切关注标本的温 度、厚度等，并依据实际温度、厚度等情况对应调 整各步骤的操作时间。应用有色瓶对染色所应用的 试剂进行保存，染色后，若出现化学反应时，需进 一步研究，并与第 2 次结果对比，若是因试剂、染 液导致的化学反应，需立即更换，确保制品的干燥 性，避免影响诊断结果。染色后仔细观察制片，并 用显微镜查验结果。

　　1.3 观察指标 (1)比较两组染色标准率、标本 合格率。(2)比较两组不同石蜡切片标本的染色 效果。

　　1.4 统计学方法 应用 SPSS 21.0 软件进行统计学分析，计量资料以( x(—) ±s )表示，采用 t 检验，计数资料以率(%)表示，采用 χ2 检验，以 P<0.05 为差异有统计学意义。

　　2 结果

　　2.1 两组染色标准率、标本合格率比较 研究组 染色标准率、标本合格率均高于对照组，差异有统 计学意义(P<0.05)。见表 1.

　　2.2 两组不同石蜡切片标本的染色效果比较 研 究组骨组织、脂肪组织、子宫内膜组织、胃镜活检、 肝胆组织的染色有效率均高于对照组，差异有统计 学意义(P<0.05)。见表 2.

　　3 讨论

　　病理诊断为现代医学中最具权威性的诊断方 法，但病理诊断的准确性不仅与病理检查医师技术 水平有关，还与组织病理切片的处理质量、染色效 果等有关 [5]。HE 染色为病理学研究中最基本、使 用最广泛的技术方法，但 HE 染色过程中的染色质量主要与细胞核染色质量有关，多是因为组织内微 小细孔较多，染料充分渗透会与组织牢固结合，染 料被组织吸收后，会出现溶解、扩散等情况 [6-8]。 此外，含酸性物质的组织可与染液中阳离子结合， 从而生成固定的分子;含碱性的物质可与染液中阳 离子结合，发挥牢固性作用 [9-10]。研究显示，细胞 与组织的 HE 染色质量受到取材操作、固定时间、 组织脱水时间等因素的影响，导致试剂的浓度发生 改变，影响制片质量，从而对诊断结果造成不良影 响 [11-12] 。常规 HE 染色技术多出现不着色或着色较 淡、不易观察和确认、漏诊或误诊风险高等情况， 影响病理诊断效能 [13] 。因此，临床需对 HE 病理染 色技术进行改进与优化。

　　本研究结果显示，研究组染色标准率、标本合 格率高于对照组。分析原因在于改良 HE 病理染色 技术对常规 HE 病理染色技术的不足进行调整优化， 苏木精染色为碱性，可将组织的嗜酸性结构等染成 蓝紫色，而伊红为酸性染料，可将组织的嗜酸性结 构染成粉红色，从而可使整个细胞组织的形态清晰 可见。而改良 HE 病理染色技术中苏木素的用量较 少， 可节约一定的成本， 且采用碘酸钾替代氧化汞， 具有无毒、无污染的特点，加入丙三醇则可避免过 度氧化，从而延长配制时间，便于长期储存，确保 较高的染色合格率 [14]。

　　本研究结果同时显示，研究组骨组织、脂肪组 织、子宫内膜组织、胃镜活检、肝胆组织的染色有 效率均高于对照组。分析原因在于改良 HE 病理染 色技术对常规 HE 染色的不足进行分析并总结，并 适宜调整各步骤的操作时间、取材方法等，可确保 最大限度的保留病理组织，避免标本、病理组织受 损而影响效果。此外，改良 HE 病理染色技术针对 小体量、大体量标本，分别适当缩短、延长固定及 脱水的时间，可实现染色最优化，从而提高不同类 型组织切片的染色有效率。对有化学反应的染色结 果进一步研究，对发生化学反应的试剂、染液立即 更换，可确保染色质量，有助于提高诊断结果的准 确性 [15]。

　　综上所述，改良 HE 染色技术应用于病理组织 石蜡切片标本诊断可提高染色标准率、标本合格率 和不同组织染色有效率，其效果优于常规 HE 染色技术诊断。

　　参考文献

　　[1] 刘晓雨，梁官钊，郭健，等 . 改良荧光染色法在皮下真菌病 组织病理诊断中的应用分析 [J]. 中华皮肤科杂志，2019.52 (5)：319-322.
　　[2] Kar A， Pattnaik K， Kar T， et al. Clear cell lesions in pathology： Histomorphologic approach to diagnosis[J]. Indian J Pathol Microbiol，2020.63(2)：177-187.
　　[3] 沈旭东，赵敏 . 胃黏膜活检组织 HE 染色苍白的原因分析 [J]. 诊断病理学杂志，2019.26(12)：871-872.
　　[4] 沈元龙，李琳，吴子豪 . 术中冰冻切片快速免疫组化 HE 染色 技术诊断硬化性肺细胞瘤和肺腺癌的应用对比 [J]. 安徽医学， 2019.40(12)： 1392-1395.
　　[5] 马峰，刘仲祥 . 病理技术 HE 染色用于病理诊断中的价值分 析 [J]. 中国实验诊断学，2015.19(12)：2103-2104.
　　[6] Runz M，Rusche D，Schmidt S， et al. Normalization of HE- stained histological images using cycle consistent generative adversarial networks[J]. DiagnPathol，2021.16(1)：71-71.
　　[7] 郑建华， 金玉兰， 邹泽阳 . 常规苏木精 - 伊红 HE 染色与环保 试剂 HE 染色的效果对比 [J]. 中国医学装备，2019.16(4)： 99-102.
　　[8] 陈志强， 陈昂， 米贤军， 等 . 聚羟基丙烯酸和 Van-clear 替代 甲醛和二甲苯在苏木精伊红染色的应用比较 [J]. 诊断病理学 杂志，2018.25(6)：469-470.
　　[9] Dhouskar S，Tamgadge S，Tamgadge A， et al. Comparison of Hematoxylin and Eosin Stain with Modified Gallego's Stain for Differentiating Mineralized Components in Ossifying Fibroma， Cemento-ossifying Fibroma， and Cementifying Fibroma[J]. J Microsc Ultrastruct，2019.7(3)：124-129.
　　[10] 姚莉洪，张美，黄美畅，等 . 酸脱钙组织苏木素 - 伊红染 色前处理改良方案 [J]. 华西口腔医学杂志，2020.38(3)： 297-300.
　　[11] Wick MR. The hematoxylin and eosin stain in anatomic pathology- An often-neglected focus of quality assurance in the laboratory[J]. Semin DiagnPathol，2019.36(5)：303-311.
　　[12] 翁丹枫，唐坚清，黎三艳 . 苏木精与伊红染液在病理小标本 制片中的应用比较 [J]. 临床与实验病理学杂志， 2019. 35(5)：610-611.
　　[13] 丁桂龄，何妙侠， 白辰光，等 . 6 种不同染色方法在检测肺 组织中新型隐球菌的应用比较 [J]. 临床与实验病理学杂志， 2019.35(1)：100-102.
　　[14] de Haan K，Zhang Y，Zuckerman JE，et al. Deep learning- based transformation of H&E stained tissues into special stains[J]. Nat Commun，2021.12(1)：4884-4884.
　　[15] Jin L，Shi F，Chun Q， et al. Artificial intelligence neuropathologist for glioma classification using deep learning on hematoxylin and eosin stained slide images and molecular markers[J]. Neuro Oncol， 2021.23(1)：44-52.
 
关注SCI论文创作发表，寻求SCI论文修改润色、SCI论文代发表等服务支撑，请锁定SCI论文网！

文章出自SCI论文网转载请注明出处：https://www.lunwensci.com/yixuelunwen/67068.html