Th17 细胞及相关趋化因子水平检测在支气管哮喘患者中的临床意义论文

　　SCI论文(www.lunwensci.com):

　　【摘要】 目的：观察 Th17 细胞及相关趋化因子水平检测在支气管哮喘患者中的临床意义。方法： 回顾性分析 2018 年 6 月至 2020 年 12 月该院收治的 112 例支气管哮喘患者的临床资料，根据疾病分期分为急性期组 60 例和缓解期组 52 例，另选择该院同期接受健康体 检的 40 名健康者的临床资料作为对照组。三组均检测外周血 Th17 细胞及其表面 CCR4、CCR6 的表达水平，比较三组外周血 Th17 细胞及 其表面 CCR4、CCR6 表达水平，并分析外周血 Th17 细胞及其表面 CCR4、CCR6 表达水平与支气管哮喘分期的相关性。结果： 急性期组外周 血 CD4+IL-17+ Th17 细胞、 CD4+IL-17+CCR4+ T 细胞、 CD4+IL-17+CCR6+ T 细胞水平均高于缓解期组和对照组， 缓解期组外周血 CD4+IL-17+ Th17 细胞、 CD4+IL-17+CCR4+ T 细胞、 CD4+IL-17+CCR6+ T 细胞水平均高于对照组， 差异有统计学意义(P<0.05); 经 Pearson 相关性分析结果显示， 外周血 Th17 细胞水平及其表面 CCR4、CCR6 表达水平与支气管哮喘疾病分期均呈正相关(P<0.05)。 结论： 外周血 Th17 细胞水平及其表面 CCR4、CCR6 水平与支气管哮喘疾病分期均呈正相关，可依据上述指标检测结果指导临床评估预后。

　　【关键词】 支气管哮喘;急性期;缓解期;Th17 细胞;趋化因子;相关性

　　Clinical significance of Th17 cell and related chemokine levels detection in patients with bronchial asthma

　　CHEN Ran, MENG Ling*, SONG Zhengchang, CAO Wenwen

　　(Department of Respiratory Diseases of the Second Affiliated Hospital of Shandong First Medical University, Taian 271000 Shandong,China)

　　【Abstract 】 Objective: To observe clinical significance of Th17 cell and related chemokine levels detection in patients with bronchial asthma. Methods: A retrospective analysis of the clinical data of 112 patients with bronchial asthma admitted to the hospital from June 2018 to December 2020 was performed. According to the disease staging, these patients were divided into acute phase group (60 cases) and remission group (52 cases). Further, the clinical data of 40 healthy people who received health examination during the same period were selected as the control group. For the three groups, the expression levels of peripheral blood Th17 cell and their surface CCR4 and CCR6 were detected. The peripheral blood Th17 cell and their surface CCR4 and CCR6 expression levels were compared among the three groups. Then, the correlations among peripheral blood Th17 cell and their surface CCR4. CCR6 expression levels and bronchial asthma staging were analyzed. Results: The levels of CD4+IL-17+ Th17 cells in the peripheral blood and the levels of CD4+IL-17+CCR4+T cells, CD4+IL-17+CCR6+ T cells in the acute phase group were higher than those in the remission group and the control group; the peripheral blood CD4+IL-17+ Th17 cells and the levels of CD4+IL-17+CCR4+ T cells, CD4+IL-17+CCR6+ T cells of the remission group were higher than those of the control group; and the differences were statistically significant (P<0.05). The Pearson analysis showed that the levels of peripheral blood Th17 cell and their surface CCR4 and CCR6 expression levels were positively correlated with the staging of bronchial asthma (P<0.05). Conclusions: Peripheral blood Th17 cell levels and surface CCR4. CCR6 levels are positively correlated with the staging of bronchial asthma. The detection of the above-mentioned index can provide references for the clinical evaluation of disease prognosis.

　　【Key words】 Bronchial asthma; Acute phase; Remission phase; Th17 cell; Chemokine; Correlation

　　哮喘临床发病率较高，发生后如果未能及时 控制，会严重威胁患者的生命安全，故需要及时治 疗。已知哮喘患者体内 Th17 细胞比例异常升高， 以 Th17 细胞异常表达为标志的免疫激活和炎症反 应在哮喘的发生、发展中起着重要作用 [1]。CC 趋化因子及其受体参与机体多种重要的生理和病理反 应，并与炎症、肿瘤、自身免疫性疾病、变态反应 等疾病相关 [2-3]。本文观察 Th17 细胞及相关趋化因 子水平检测在支气管哮喘患者中的临床意义。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料 回顾性分析 2018 年 6 月至 2020 年12月本院收治的 112例支气管哮喘患者的临床资料。 纳入标准：符合《支气管哮喘防治指南(支气管哮 喘的定义、诊断、治疗及教育和管理方案) 》中的相关诊断标准 [4];结合临床症状、变应原检测、胸部 X 线检查及肺功能检查等确诊;参与研究前 1 个月未使用免疫抑制剂或糖皮质激素;临床资料完整。排除标准：合并肝肾功能异常者;合并免疫系统疾病者;妊娠或哺乳期者。根据疾病分期将患者分为急性期组 60 例和缓解期组 52 例，另选择同期该院接受健康体检的 40 名健康者的临床资料作为对照组。研究对象对本研究内容了解并自愿签署知情同意书。急性期组：男 34 例，女 26 例;年龄 31~50 岁，平均(35.8±2.9)岁;病程1~4年，平均(2.8±0.5)年。缓解期组：男 30 例，女 22 例;年龄 31~52 岁，平均(36.0±1.9)岁;病程1~4年，平均(2.9±0.4)年。对照组：男 22 名，女 18 名;年龄 31~52 岁，平均(35.9±1.4)岁。三组性别、年龄等一般资料比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，有可比性。

　　1.2  方法

　　1.2.1  样 本 采 集  采 集 三 组 清 晨 空 腹 静 脉 血5 mL，置于含有肝素的试管中，2000 r/min，离心10 min， 离心半径 5 cm，然后置于 -80 ℃保存。

　　1.2.2  外周血 Th17 细胞及其表面 CCR4、CCR6 表达水平检测  在标志有相应样本的试管中，加入淋巴细胞分离液，密度梯度分离后收集中间悬浮的细胞，分别孵育 CD4、IL-17、CCR4、CCR6 的荧光抗体 20 min，之后加入破膜剂后继续孵育 5 min，最后采用流式细胞仪测定 CD4+IL-17+ 阳性细胞表面的 CCR4、CCR6 荧光抗体。

　　1.3  观察指标  (1)比较三组外周血 Th17 细胞及其表面 CCR4、CCR6 表达水平。(2)分析外周血 Th17 细胞及其表面 CCR4、CCR6 表达水平与支气管哮喘分期的相关性。

　　1.4  统计学方法  应用 SPSS 20.0 软件进行统计学分析，计量资料以(x—±s)表示，采用 t 检验，采用 Pearson 相关性分析相关性，以 P<0.05 为差异有统计学意义。

　　2  结果

　　2.1  三组外周血 Th17 细胞及其表面 CCR4、CCR6表 达 水 平 比 较  急 性 期 组 外 周 血 CD4+IL-17 Th17 细 胞、CD4+IL-17+CCR4+ T 细胞及 CD4+IL-17+CCR6+ T细胞水平均明显高于缓解期组和对照组，缓解期组外周血 CD4+IL-17+ Th17 细胞、CD4+IL-17+CCR4+ T 细胞及 CD4+IL-17+CCR6+ T 细胞水平高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表 1.

　　2.2  外周血 Th17 细胞及其表面 CCR4、CCR6 表达水平与支气管哮喘分期的相关性分析  Pearson 相关性分析结果显示，外周血 Th17 细胞水平及其表面 CCR4、CCR6 表达水平与支气管哮喘分期均呈正 相 关(r1=0.815.P1=0.000;r2=0.559.P2=0.031; r3=0.754.P3=0.020)。

　　3  讨论

　　支气管哮喘是一种常见的呼吸道疾病，在全球范围内发病率较高，且呈上升趋势，严重威胁患者的生命安全。已知该疾病是由多种细胞及细胞组分参与的慢性气道炎症，炎性细胞(如嗜酸性粒细胞、肥大细胞及 T 淋巴细胞等)及炎性介质参与了支气管哮喘发生和发展的整个过程，其中 CD4+ T 细胞在哮喘气道反应中起着重要的作用 [5]。Th17 细胞是近年来发现的一种新的效应性 CD4+ T 细胞亚群，其在哮喘发病机制中的作用已经成为研究的热点，成熟的 Th17 会分泌 IL-17、IL-23 等多种细胞因子，从而诱导 CCR4 及 CCR6 等多种趋化因子产生，这些趋化因子会促进炎性组织分泌炎性因子，进一步加重机体的炎症程度 [6]。研究显示，Th17 及其分泌的细胞因子在支气管哮喘患者的肺部组织、痰液及肺泡灌洗液中水平较高，且气道高反应性的严重程度与 Th17 水平密切相关 [7-9]。

　　趋化因子是由不同类型细胞分泌的低分子量的细胞因子，CCR4 及 CCR6 均属于 CC 类趋化因子受体家族成员 [10-11]。炎性趋化因子是在前炎性细胞因子或病原因子刺激下，由炎症部位的固有细胞和渗出细胞所产生的，其主要作用是募集效应细胞(包括单核细胞、粒细胞和效应细胞)。CCR4主要表达于多种淋巴细胞表面，其亲和力配体为胸腺和活化调节趋化因子。表达在 Th17 细胞及调节性 T 细胞表面的 CCR4 与其配体结合发挥免疫效应 [12-13]。CCR6 主要表达在 B 细胞及记忆性 T 细 胞表面，且优先表达于 Th17 细胞表面。本研究结 果显示，急性期组外周血 CD4+IL-17+ Th17 细胞、 CD4+IL-17+CCR4+ T 细胞及 CD4+IL-17+CCR6+ T 细 胞水平均高于缓解期组和对照组，缓解期组外周 血 CD4+IL-17+ Th17 细 胞、 CD4+IL-17+CCR4+ T 细 胞及 CD4+IL-17+CCR6+ T 细胞水平高于对照组;经 Pearson 相关性分析结果显示，外周血 Th17 细胞水 平及其表面 CCR4、CCR6 表达水平与支气管哮喘 疾病分期均呈正相关。分析原因是支气管哮喘是一 种异质性疾病，可引起过敏性气道炎症反应，作为 促炎性物质，Th17 相关趋化因子 CCR4、CCR6 在 哮喘患者中高表达，且可加重气道高反应性，并诱 导细胞释放大量炎性因子，致使急性期患者炎症加 重，缓解期次之。

　　综上所述，外周血 Th17 细胞水平及其表面 CCR4、CCR6 水平与支气管哮喘疾病分期均呈正相 关，可依据上述指标检测结果指导临床评估预后。

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