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【摘要】 目的：分析幽门螺杆菌（Hp）感染对慢性胃炎患者胃内菌群分布与胃黏膜细胞增殖和凋亡的影响。方法：回顾性分析2018 年 1 月至 2019 年 12 月该院收治的 200 例慢性胃炎患者的临床资料，观察患者 Hp 感染情况，并比较 Hp 阳性、Hp 阴性患者的胃内菌群分布及胃黏膜上皮细胞增殖、凋亡情况。结果：200 例慢性胃炎患者中，Hp 阳性 137 例（68.50%）；Hp 阳性患者的肠杆菌、乳酸菌检出率低于 Hp 阴性患者，厌氧菌检出率高于 Hp 阴性患者，差异均有统计学意义（P<0.05）；两组酵母菌、链球菌检出率比较，差异无统计学意义（P>0.05）；Hp 阳性患者胃黏膜上皮细胞增殖指数、凋亡指数均高于 Hp 阴性患者，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：慢性胃炎患者中 Hp 感染率较高，Hp 感染会严重影响胃内菌群结构，还能诱导胃黏膜上皮细胞的增殖和凋亡。
【关键词】 幽门螺杆菌；慢性胃炎；胃内菌群分布；细胞增殖；细胞凋亡
幽门螺杆菌（Hp）与胃部诸多病变存在相关性， 感染 Hp 会影响胃内其他微生物的生存，改变胃内微生态环境 [1]。有害菌过度繁殖和益生菌数量减少均会影响胃黏膜细胞的增殖，引发胃部炎症 [2]。本文分析 Hp 感染对慢性胃炎患者胃内菌群分布和胃黏膜细胞增殖的影响。
1 资料与方法
1.1 一般资料 回顾性分析 2018 年 1 月至 2019 年12 月本院收治的200 例慢性胃炎患者的临床资料。纳入标准：符合《中国慢性胃炎共识意见》中关于浅表性胃炎诊断标准 [3]；近期无消化道手术史。排除标准：伴有胃癌、胃出血、胃溃疡等疾病；2 周内服用过抗生素治疗。患者中男 103 例，女 97 例； 年龄 25~69 岁，平均（43.57±2.17）岁；病程 1~10 年，平均（4.51±1.32）年。
1.2 方法
1.2.1 Hp 感染检测 胃镜下钳取胃窦处胃黏膜组织，制备组织匀浆液，取 100 μL 接种于血琼脂平板上，37 ℃ 85%N2+10%CO2+5%O2 环境下培养 3 d， 用快速尿素酶试验鉴定可疑菌落，最终颜色为浅红色或玫瑰色视为阳性，黄色则视为阴性。
1.2.2 胃内菌群分布检测 在胃镜下采集胃窦、胃体、胃底的胃黏膜组织各 1 块，每块大小为 1 mm× 2 mm，加入无菌生理盐水后制备组织匀浆。取100 μL 接种于细菌培养基上，厌氧菌、乳酸菌培养基放置于厌氧培养箱中，37 ℃培养 48 h；链球菌、酵母菌、肠杆菌培养基放置在有氧环境下， 37 ℃培养 48 h。培养结束后采用 VITEK2 Compact 全自动微生物分析系统（生物梅里埃美国股份有限公司，国械注进 20162222277）进行菌种鉴定。
1.2.3 胃黏膜上皮细胞增殖、凋亡检测 采用免疫组化染色法检测，胃黏膜组织用石蜡包埋，切片。经苏木精 - 伊红（HE）染色，细胞核和细胞质呈均匀棕黄色为增殖期细胞。经脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记（TUNEL）染色，细胞核出现棕褐色颗粒或呈棕黄色为凋亡细胞。
1.3 观察指标 （1）Hp 感染情况。（2）比较Hp 阳性、Hp 阴性患者的胃内菌群分布。（3）比较Hp 阳性、Hp 阴性患者的胃黏膜上皮细胞增殖、凋亡情况。根据胃黏膜组织切片的免疫组化检测结果， 每张切片至少观察 5 个以上高倍视野，1000 个以上完整胃小凹上皮细胞，根据每 100 个胃小凹上皮细胞内的阳性细胞数，计算增殖指数、凋亡指数。
1.4 统计学方法 应用 SPSS 20.0 软件进行统计学分析，计量资料以（x—±s）表示，采用 t 检验，计数资料以率（%）表示，采用 χ2 检验，以 P<0.05 为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 Hp 感染情况 200 例慢性胃炎患者中，Hp 阴性 63 例（31.5%），Hp 阳性 137 例（68.5%）。Hp 阳性与阴性患者胃内菌群分布比较 Hp 阳性患者的肠杆菌、乳酸菌检出率均低于 Hp 阴性患者，厌氧菌检出率高于 Hp 阴性患者，差异均有统计学意义（P<0.05）；两组酵母菌、链球菌检出率比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。见表 1。
2.3 Hp 阳性与阴性患者胃黏膜上皮细胞增殖与凋亡情况比较 Hp 阳性患者胃黏膜上皮细胞增殖指数、凋亡指数均高于 Hp 阴性患者，差异有统计学意义（P<0.05）。见表 2。
3 讨论
人体胃内存在很多耐酸微生物，例如乳杆菌、链球菌、厌氧菌等，这些菌群可维持胃内生态平衡 [4]。Hp 感染会破坏胃内微生态环境，导致多种胃部疾病，引起慢性胃炎和胃溃疡 [5]。本文 200 例慢性胃炎患者中，Hp 阳性率为 68.5%，与临床报道一致 [6]。
本研究结果显示，Hp 阳性患者的肠杆菌、乳酸菌检出率均低于 Hp 阴性患者，厌氧菌检出率高于Hp 阴性患者。分析原因为，Hp 在胃内定植会抑制有益菌肠杆菌、乳酸菌的生长，升高胃内 pH 值， 使厌氧菌数量显著增加 [7]。此外，Hp 阳性、阴性患者的酵母菌、链球菌检出率比较，差异均无统计学意义，具体机制尚不清楚，后期仍需加大样本量进行深入研究。
本研究结果还显示，Hp 阳性患者胃黏膜上皮细胞增殖指数、凋亡指数均高于 Hp 阴性患者。分析原因为，细胞增殖和凋亡是受基因编码控制的过程，Hp 感染可影响胃内环境，诱发免疫损伤和炎症反应，激活细胞增殖和凋亡的相关基因，诱导胃黏膜上皮细胞增殖和凋亡 [8]。
综上所述，慢性胃炎患者中 Hp 感染率较高， Hp 感染会严重影响胃内菌群结构，还能诱导胃黏膜上皮细胞的增殖和凋亡。
参考文献
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[4] 赵宇阳，李慧，张艳 . 胃及口腔幽门螺杆菌感染与慢性胃炎的相关性分析 [J]. 中国实验诊断学，2018，22（3）：507-508.
[5] 刘舒，任茜，王玉平，等 . 幽门螺杆菌与胃肠黏膜病变的相关性研究进展 [J]. 医学综述，2018，24（16）：3200-3204.
[6] 吴丽丽，彭丽华，杨云生，等 . 根除幽门螺杆菌疗法对肠道菌群影响的研究现状 [J]. 中华内科杂志，2013，52（12）：1075-1076.
[7] 彭贤慧，周丽雅，何利华，等 . 幽门螺杆菌感染者胃内菌群特征分析 [J]. 胃肠病学和肝病学杂志，2017，26（6）：658-663.
[8] 夏红，李少飞，任庆国 . 幽门螺杆菌感染促进胃炎儿童胃粘膜细胞的增殖 [J]. 基因组学与应用生物学，2020，39（3）：1426-1431.
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