SCI论文（www.lunwensci.com）:
摘要：目的通过防栓合剂对实验动物长期毒理的研究，综合评价该中药复方制剂的安全性，为其进一步临床推广应用提供科学的安全依据。方法取4-5周龄的SD大鼠88只，♀♂各半，按体重随机均分为4组，分别为对照组及防栓合剂50.0原生药g·kg-1、25.0原生药g·kg-1、5.0原生药g·kg-1组。每天灌胃给药1次，连续给药一月。每周测体重、摄食量1次，并根据体重调整给药量，逐日观察。给药1月末时进行血液细胞学、血清生化指标及主要脏器病理切片检查。结果①给药1月后未发现防栓合剂各剂量对大鼠毛发、粪便、行为活动、体重及摄食量有明显影响。②血液细胞学指标检测结果显示：防栓合剂50.0原生药g·kg-1组♂大鼠NEUT升高；防栓合剂5.0原生药g·kg-1组♀大鼠WBC、RBC、HGB升高。血清生化学指标检测结果显示，防栓合剂50.0原生药g·kg-1组♀大鼠AST、UREA、CREA及CK降低；♂大鼠UREA、CREA、CK降低；♂♀合并大鼠血清AST、UREA、CREA、CK降低。防栓合剂25.0原生药g·kg-1组♀大鼠UREA、CREA降低；♂大鼠UREA、CREA及CK降低；♂♀合并大鼠UREA、CREA、CK降低。防栓合剂5.0原生药g·kg-1组♀大鼠AST降低；♂大鼠AST、UREA、CK降低；♂♀合并大鼠AST、UREA、CK降低。以上指标与对照组同性别大鼠比较差异均有统计学意义（P<0.05，P<0.01）。病理检测发现：对照组见甲状腺腮后体残留3例，肝脏肝细胞坏死伴炎细胞浸润3例，肝细胞空泡形成3例，肾脏间质慢性炎细胞浸润1例，肾小管钙化物沉积1例，肾小管囊性扩张1例，前列腺间质慢性炎细胞浸润5例；防栓合剂50.0原生药g·kg-1组甲状腺腮后体残留2例，肝脏肝细胞坏死伴炎细胞浸润4例，肝细胞空泡形成3例，肾脏间质慢性炎细胞浸润1例，肾小管囊性扩张2例。结论连续灌胃防栓合剂各剂量1个月，对大鼠的体重增长、摄食量、生化指标以及血液学指标均无明显的病理性损伤，提示灌胃防栓合剂对大鼠无明显的蓄积性毒性作用，其安全剂量为50.0 g/kg，约为临床人用量的23.4倍。
关键词：防栓合剂；大鼠；长期毒性
本文引用格式：黄琴,喻小兰,钟丽君,等.防栓合剂长期毒理学研究[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(104):183-184.
0引言
防栓合剂是在圣愈汤、桃红四物汤等方的基础上加减化裁而来制成的中药复方制剂，前期大量的临床试验[1]已经证明防栓合剂可以预防深静脉血栓的发生；本研究旨在观察通过反复灌胃给予大鼠不同剂量防栓合剂可能出现的因药物蓄积所引起的毒性反应、迟发性毒性反应以及毒性反应的可逆性，找到其可能的毒性反应主要靶器官，剂量-毒性效应关系，时间-毒性效应关系；为临床安全用药的剂量设计提供参考依据。
1实验材料
1.1药品。防栓合剂，深棕色流浸膏，每1 mL浸膏含原生药3.04 g，批号20161011，由叙永县中医医院提供。临用时用去离子水配制成所需浓度的混悬液，4℃冰箱密封保存，本试验剂量按原生药g·kg-1计算。
1.2主要试剂。血清生化检测试剂盒：丙氨酸转氨酶（ALT）试剂盒，批号1115041；天门冬氨酸转氨酶（AST）试剂盒，批号1115031；尿素氮（UREA）试剂盒，批号0816061；肌苷（CREA）试剂盒，批号0814191；肌酸磷酸激酶（CK）试剂盒，批号0415021。以上试剂盒均由四川迈克生物科技股份有限公司提供。血液细胞稀释液，批号G6332；网织红细胞（RET）染液，批号ZA6002；均由Sysmex医用电子有限公司提供[2]。戊巴比妥钠，批号11M6233S，Sigma公司。
1.3实验动物。SD大鼠，SPF级，♀♂各半，由四川省中医药科学院实验动物中心。合格证号：SCXK（川）2013-19。
2试验环境
四川省中医药科学院实验动物中心SPF屏障系统，室内温度20℃-22℃，相对湿度52%左右，照明12 h/12 h明暗交替。合格证号为SYXK（川）2013-100。
3试验方法
3.1剂量的选择和设置。参考防栓合剂急毒及药效学相关文献设置长毒剂量[2-3]。小鼠灌胃防栓合剂的LD50大于243.2原生药g·kg-1；主要药效学大鼠有效剂量为4.0原生药g·kg-1，小鼠为10.0原生药g·kg-1；临床有效量折算成大鼠等效剂量为13.5原生药g·kg-1，小鼠19.5原生药g·kg-1。故共设4个组，即防栓合剂50.0原生药g·kg-1（大鼠能够顺利给药的最大给药量）、25.0原生药g·kg-1、5.0原生药g·kg-1（分别相当临床人日拟用剂量的23.4倍、11.7倍和2.34倍）及对照组。
3.2给药途径和分组。选用4-5周龄的SD大鼠，♀♂各半，饲养、观察3 d无异常者用于实验。将88只大鼠按体重、性别随机均分入各组，每组大鼠22只。因防栓合剂临床给药途径为口服，故长期毒性试验采取灌胃方式给药。
3.3饲料及喂养。实验大鼠放于塑料笼中喂养，5-6只/笼，用四川省中医药科学院实验动物中心提供的全价营养颗粒饲料，自由饮水。
3.4检测时间。给药1个月，各组取22只实验大鼠，♀♂各半，进行系统检测。
3.5检测项目和方法
3.5.1一般观察：给药期间，逐日观察实验大鼠的外观、活动、饮食、粪便等情况，每周称量体重并测定其摄食量等。
3.5.2血液学检查：血液细胞学检测指标：红细胞计数（RBC）、血红蛋白（HGB）、白细胞计数（WBC）、血小板计数（PLT）、中性粒细胞计数（NEUT）及其百分率（NEUT%），以上指标均用全自动血液分析仪进行检测。PT：采用凝固法。生化学检测：AST、ALT、UREA、CREA、CK。上述指标按试剂盒提供厂家指定的操作方法进行检测[3]。
3.5.3系统尸检和脏器系数的测定：在给药后1个月及恢复期结束时，戊巴比妥钠麻醉腹主动脉取血后，立即进行解剖，肉眼观察各器官的外观形态变化，取脑、胸腺、心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、卵巢（或睾丸）、子宫（或附睾）等主要器官称重，并计算其脏器系数。
3.5.4病理组织学检查：取实验大鼠脑（大脑、小脑、脑干）、垂体、脊髓（颈、胸、腰段）、食管、胃、肝、肾、脾、气管、主动脉、附睾、睾丸、卵巢、前列腺、坐骨神经、胸骨（骨髓）、胸腺、甲状旁腺、唾液腺、小肠、大肠、肾上腺、胰腺、肺、心、子宫、乳腺（雌）、膀胱、肠系膜淋巴结等主要脏器，用10%甲醛固定作病理组织学显微镜检。先检查对照组和药物大剂量组大鼠主要脏器的病理组织学，如药物大剂量组大鼠发现明显病变则继续检查中、小剂量组大鼠的相应器官。
4统计学分析
资料用均值±标准差（±s）表示，组间差异用t检验进行统计学分析。
5实验结果
5.1防栓合剂对大鼠一般状况的影响给药期间，未发现防栓合剂各剂量对大鼠毛发、粪便、行为活动有明显影响。
5.2防栓合剂对大鼠体重的影响。
6讨论与分析
防栓合剂是由黄芪、党参、丹参、赤芍、当归、桃仁、红花、川芎、枳实、酒大黄、川牛膝等中药组成。其中黄芪味甘，性微温，归脾肺经，具有补气升阳、益卫固表、托疮生肌、利水消肿等功效，研究表明[4-5]黄芪无急性及慢性毒性作用，可较大剂量长期服用.党参味甘，性平，归脾肺经，具有补中益气、健脾益肺之功效，临床应用应严格规范剂量，注意药物之间配伍关系。综上，防栓方组成药物中少数药物具有较小毒性，通过药物的配伍及炮制方法能够将药物的毒性作用有效减低或者消除。
给大鼠灌胃不同剂量的防栓合剂，对大鼠行为、毛发、粘膜、排泄物、分泌物等无明显影响，对大鼠体重及摄食量亦无明显影响。防栓合剂50.0原生药g·kg-1组见甲状腺腮后体残留1例，前列腺间质慢性炎细胞浸润2例。结合脑、乳腺、肾上腺、卵巢、子宫、附睾等器官病检无异常发现，提示，防栓合剂对大鼠内分泌系统无明显影响。各组肺、脾、胸腺病理检查无异常发现，提示防栓合剂对大鼠呼吸系统及免疫系统无明显影响[4-5]。
7结论
连续灌胃防栓合剂各剂量1个月对大鼠的体重增长、摄食量、主要脏器、生化指标以及血液学指标均无明显的病理性损伤，提示灌胃防栓合剂对大鼠无明显的蓄积性毒性作用及停药后反应，其安全剂量为50.0 g原生药/kg，约为临床人用量的23.4倍。
参考文献
[1]吴敏,王永周.妇产科术后深静脉血栓形成原因及其防治进展[J].西南军医,2016,18(6):572-574.
[2]刘剑刚,许秀森,刘唯佳.脑康复冲剂抗血栓作用的药效学研究[J].河北医学,2000(1):7-10.
[3]黄芳华,王庆利.药物遗传毒性研究技术指导原则的修订[J].毒理学杂志,2007(4):279-280.
[4]夏丽英.现代医药毒理学[M]天津:天津科技翻译出版公司,2005:687-688.
[5]刘阳,张云鹏,孙影,等.中药黄芪长期毒性试验研究[J].现代中西医结合杂志,2009,18(29):3545-3546.
关注SCI论文创作发表，寻求SCI论文修改润色、SCI论文代发表等服务支撑，请锁定SCI论文网！ 文章出自SCI论文网转载请注明出处：https://www.lunwensci.com/yixuelunwen/25759.html
