红细胞输注疗效和铁过载对再生障碍性贫血患者T淋巴细胞亚群的影响论文

 

　　关键词：铁过载,铁蛋白,红细胞输注疗效,再生障碍性贫血

 

 

　　再障性贫血是一种以造血干细胞和造血微环境为核心的恶性血液病，其临床表现为造血干细胞增殖和外周血全血细胞数量下降，并伴随有出血、贫血和感染等并发症，严重威胁人类健康[1]。对于这类病人而言，输血疗法具有积极的效果。然而，若长时间进行输血，可能会导致铁的过多积累，从而引发组织损伤，并最终导致内脏器官功能障碍。此外，疾病的进展和预后与铁的过多积累密切相关，同时还可能导致输血疗效不佳[2-3]。研究发现[4]，长期输血导致地中海贫血患者铁超载，进而损害了机体组织和器官，对病情的发展产生了影响。铁是生物体必需的营养元素，在能量代谢、DNA合成和氧气运输等方面发挥着重要作用，然而，过量的铁会通过芬顿（Fenton）反应生成ROS，导致细胞损伤。保持铁的含量在一个正常的范围是很重要的。研究发现，铁过多会通过激活氧化应激反应来调节T淋巴细胞的数量和功能。T淋巴细胞在机体免疫系统中扮演着重要的角色[5]。此外，在血液病患者中，依赖输血的治疗无效是较普遍的现象，其主要原因大多归结为免疫问题。鉴于此，本文就红细胞输注疗效和铁过载再生障碍性贫血患者对T淋巴细胞亚群的影响进行分析，结果如下。

 

 

　　囊括2022年1—12月北大医疗鲁中医院收治的再生障碍性贫血患者68例为研究对象，依据输注是否有效分为输注有效组与输注无效组，每组34例。两组患者一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），详见表1。

 

　　纳入标准：①所有患者均符合《血液病诊断及疗效标准》中再生障碍性贫血相关诊断标准；②依据骨髓检查、血常规、骨髓活检确诊；③临床检查资料无缺失。排除标准：①伴有严重心脑血管疾病；②伴有免疫系统、肝肾疾病；③妊娠期、哺乳期女性。

 

 

　　（1）仪器与试剂：本研究使用的设备包括自动血液分析仪和相应的试剂。流式细胞仪采用Beckman Coulter FACSCantoⅡ五色流式细胞仪，购自美国Beckman Coulter公司，使用了单克隆抗体（批号：6607073，规格0.5mL）和单色鼠抗人单克隆抗体CD25-FITC（批号：IMl026，规格：0.5mL）。自动生化分析仪采用Abbott C1600全自动生化分析仪，购自美国Abbott公司，并使用了相应的配套试剂。

 

　　（2）血常规检测：取出2mL外周静脉血样（晨起空腹血），并放入内含乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）的抗凝管中。随后，使用全自动分析仪对血液进行血常规检测，检测过程在2h内完成。

 

　　（3）T淋巴细胞亚群检测：提取2mL的静脉血样本，并使用EDTA-K2进行抗凝剂处理。在接下来的6h内，对样本进行染色并置于机器上进行检测。将10μL不同荧光标记的单抗注入流式试管中，然后与100μL的外周血混合，在避光、室温条件下静置20min。接着，加入2mL溶血素，在室温下继续静置20min，随后以1000r/min的速度离心5min，分离得到上清液。再用2mL PBS洗涤上清液，以1000r/min的速度离心5min，得到新的上清液。最后，使用500μL PBS对细胞进行重构，并使用流式细胞仪测定淋巴T细胞亚群的水平。

 

　　（4）血清铁蛋白检测：外周静脉血样4mL（晨起空腹血），将其放置于促凝管中，待血液凝固后，在3500r/min下离心5min，保存血清。血清样品将在6h内配备全自动生化分析仪进行检验完成。

 

 

　　全文数据均采用SPSS 19.0统计软件进行计算分析，其中均数±标准差（x—±s）用于表达计量资料，χ2用于检验计数资料，P决定是否有差异，其中P<0.05表示数据具有统计学意义。

 

 

 

　　两组患者T淋巴细胞检验结果指标相比，差异无统计学意义（P>0.05），详见表2。

 

 

 

　　输血有效组中非铁过载患者CD3+指标高于铁过载，差异有统计学意义（P<0.05），两组患者CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+/CD8+及CD4+CD25+指标相比，差异无统计学意义（P>0.05），详见表3。

       2.3输血无效组铁过载T淋巴细胞检验结果

 

　　输血无效组中非铁过载患者CD3+指标高于铁过载，差异有统计学意义（P<0.05），两组患者CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+/CD8+及CD4+CD25+指标相比，差异无统计学意义（P>0.05），详见表4。

 

 

　　再障是一种常见的血液系统疾病，其发生与造血干细胞、造血微环境和免疫等因素有关。对于这种类型的患者需要进行长时间输血的治疗。每个输血单位中约含有100mg的铁，然而，其体内关于铁的代谢调控机制目前尚未完全明确[6-7]。输注的衰老红细胞能被巨噬细胞吞噬，不稳定的铁会进入血浆，并与转铁蛋白结合。当转铁蛋白达到饱和时，非转铁蛋白所带的铁会在各个器官中积聚，导致铁过载并引发一系列并发症。大量研究表明[8-9]，铁超载对骨髓增生异常综合征、再生障碍等疾病的造血功能造成抑制，而通过铁螯合疗法可取得一定疗效。

 

　　在这些病人中，免疫系统功能紊乱是导致造血功能异常的重要原因。这些病人的T淋巴细胞过度活化，CD4+和CD8+亚群的数量和比例发生了改变，引起机体免疫功能的变化，进而影响机体的血液系统，进而引起全血细胞下降[10]。目前，铁超载与机体免疫之间的联系日益受到重视，已有研究表明，铁超载会导致ROS增加，进而导致造血干细胞和造血支持细胞的数量和功能受损[11]。因此，一方面，再障病人的长期输血会造成铁超载，而铁超载会影响造血功能；另一方面，长期输血又会造成输血无效，这是目前临床面临的主要问题。本次研究结果显示，两组患者T淋巴细胞检验结果指标相比，差异无统计学意义（P>0.05）；输血有效组及输血无效组患者非铁过载患者CD3+指标均高于铁过载，差异有统计学意义（P<0.05）。研究发现，输注效果不会改变患者的T细胞亚群，并将其分为有无铁超载的患者，其CD3+T细胞的比例与未发生铁超载的患者相比，均有明显的下降[12]。铁超载可诱导机体产生ROS，并可通过p38 MAPK/p53、p21 WAFl/Cipl/Sdil等途径调控T细胞，进而影响机体免疫功能，引起细胞凋亡。再障患者因铁超载引起的ROS生成增多，促使T细胞衰老、凋亡，使其比例明显下降。

 

　　综上所述，患者长期依靠红细胞输注会造成铁过载，而铁过载会对CD3+T淋巴细胞产生影响，特别是在红细胞输注有效的情况下。

 

 

　　[1]潘田中,汤宝林,朱小玉,等.移植前铁过载对重型再生障碍性贫血异基因造血干细胞移植疗效的影响[J].器官移植,2020,11(2):234-239.

 

　　[2]俞颖,朱琳超,李强,等.铁过载对再生障碍性贫血患者外周血淋巴细胞亚群的影响[J].浙江医学,2020,42(8):766-769.

 

　　[3]汤如,李承君,吴燕明.铁代谢参数判断骨髓增生异常综合征和再生障碍性贫血患者铁负荷过载的临床价值[J].临床和实验医学杂志,2021,20(11):1181-1185.

 

　　[4]KIM,IL-HWAN,MOON,JOON-HO,LIM,SUNG-NAM,et al.Efficacy and safety of deferasirox estimated by serum ferritin and labile plasma iron levels in patients with aplastic anemia,myelodysplastic syndrome,or acute myeloid leukemia with transfusional iron overload[J].Transfusion:The Journal of the American Association of Blood Banks,2015,55(7):1613-1620.

 

　　[5]刘甜甜,李明,朱含汀,等.创缘铁过载的临床样本验证与铁过载对小鼠创面愈合的影响[J].中华损伤与修复杂志（电子版）,2022,17(6):475-481.

 

　　[6]仇如意,叶宝东,侯佳慧,等.“补肾活血”法治疗慢性再生障碍性贫血患者输血相关性铁负荷过载的效果分析[J].中国输血杂志,2021,34(7):720-724.

 

　　[7]鲁恒珍,张煌,周帅跃,等.淋巴细胞、血细胞及骨髓细胞检测在鉴别再生障碍性贫血与低增生性骨髓增生异常综合征中应用价值[J].临床军医杂志,2021,49(9):1053-1054,1057.

 

　　[8]韩慧杰,李陈芃,盖灿.外周血T淋巴细胞亚群检测在再生障碍性贫血患者中的作用以及临床意义[J].中国医药导报,2021,18(11):78-81.

 

　　[9]赵立新.再生障碍性贫血和低增生性骨髓增生异常综合征外周血中淋巴细胞亚群的表达研究[J].实用中西医结合临床,2019,19(8):129-131.

 

　　[10]王一.再生障碍性贫血患者外周血淋巴细胞亚群分布异常的临床研究[J].中国卫生检验杂志,2019,29(16):1971-1973.

 

　　[11]詹昱,曲佳,冯可欣,等.IL-2/GM-CSF体外处理的外周血单个核细胞对再生障碍性贫血小鼠T淋巴细胞亚群及细胞因子的影响[J].中国现代医学杂志,2020,30(12):1-6.

 

　　[12]赵亚军,孙兴卫.再生障碍性贫血患者T淋巴细胞亚群表达特点[J].热带医学杂志,2019,19(2):204-206.