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【摘要】目的：探讨神经菌毛蛋白 1（NRP-1）在透明细胞肾细胞癌（ccRCC） 中的表达及临床意义。 方法： 选取 2018 年 7 月至 2020 年 7 月 525 例 ccRCC 患者为 ccRCC 组；选取同期 105 名健康体检者为健康组。两组均采用免疫组化 SP 法检测 NRP-1 阳性率，比较 两组 NRP-1 阳性率，以及 NRP-1 水平与 ccRCC 患者临床分期、分级的关系。 结果： ccRCC 组 NRP-1 阳性表达率为 76.38%，明显高于对 照组的 17.14%，差异有统计学意义（P<0.05）。临床分期为Ⅲ期、Ⅳ期 ccRCC 患者 NRP-1 表达强度高于Ⅰ期、Ⅱ期；Furman 分级为Ⅲ 级、Ⅳ级 ccRCC 患者 NRP-1 表达强度高于Ⅰ级、Ⅱ级， 差异均有统计学意义（P<0.05） 。结论： ccRCC 患者 NRP-1 水平高于健康体检者， NRP-1 水平检测可作为 ccRCC 诊断的参考依据。
【关键词】透明细胞肾细胞癌；神经菌毛蛋白 1；检测；诊断
透明细胞肾细胞癌（ccRCC）是临床常见的恶 性肿瘤， 发病率和病死率均较高 [1] ，晚期 ccRCC 患 者 5 年存活率不超过 10%[2] 。作为跨膜蛋白中的一 种，神经菌毛蛋白 1（NRP-1）在血管内皮细胞中 分布较为广泛，参与肿瘤新生血管过程，其水平在 许多肿瘤样本中均呈现增高趋势， 且与肿瘤转移呈 正相关 [3]。本文观察 NRP-1 在 ccRCC 中的表达及临 床意义。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取 2018 年 7 月至 2020 年 7 月 本院收治的 525 例 ccRCC 患者为 ccRCC 组。纳入 标准：实施根治性手术，术后病理确诊为 ccRCC[4]； 术后标本保存良好；待测组织充分。排除标准：合 并精神疾病；合并其他恶性肿瘤；术前经放化疗； 意识障碍；合并免疫系统疾病。另选取同期 105 名 健康体检者为健康组。研究对象对本研究内容了解 且自愿签署知情同意书，研究经本院伦理委员会同 意。ccRCC 组：男 324 例， 女 201 例；年龄 35~70 岁， 平均（50.64±13.21）岁。健康组：男64名， 女41名；年龄36~71岁， 平均（50.53±13.28）岁。两组性别、 年龄比较，差异均无统计学意义（P>0.05）， 有可比性。
1.2 方法 两组均采用免疫组化 SP 法检测 NRP-1 阳性表达率，具体方法为，先制备石蜡切片，切片经二甲苯脱蜡、乙醇脱水， 0.01% 磷酸盐缓冲液 （PBS） 冲洗 3 次，3 min/ 次， 用 3% 的过氧化氢 在室温中孵育 10 min，以消除内源性过氧化氢，再 用 PBS 冲洗 3 次，3 min/ 次， 将切片放置在 0.01 M 的枸橼酸中，采用 100 ℃的微波修复 10 min，冷却 后，PBS 冲洗 3 次，3 min/ 次， 加入一抗， 稀释比 例为 1 ∶ 100， 4 ℃过夜， PBS 代替一抗为阴性对 照，PBS 冲洗 3 次，3 min/ 次。加入采用生物素标 记的二抗。室温孵育 10 min， PBS 冲洗，加入链霉 亲和素 - 过氧化物酶， 室温孵育 10 min， PBS 冲洗。 DAB 呈色，1~2 min，流水冲洗 2 min，苏木精轻度 复染 3 min。流水冲洗 5 min，10% 盐酸酒精分色， 流水冲洗 3 min，电风扇吹干 20 min，干燥。在光 镜下观察免疫组化切片，采用免疫着色强度与阳性 细胞所占比例作为定量评分标准，显示于胞质中， 判读结果，将阳性细胞百分比分为 4 级，百分数精 确到个位。阳性细胞数所占比例为 0~10%， 计 0 分， 为阴性（-） ；阳性细胞数所占比例为 11%~50%， 计 1 分，为弱阳性（+） ；阳性细胞数所占比例为 51%~80%， 计 2 分， 为中等阳性（++）； 阳性细 胞数所占比例 >80%， 计 3 分， 为强阳性（+++）。 着色强度无色为 0 分（-） ，淡黄色为 1 分（+） ， 棕黄色为 2 分（++）， 褐棕色为 3 分（+++）。采 取积分综合计量进行评价。积分综合计量 = 着色强 度评分 × 阳性细胞所占比例评分。即阴性为 0 分， 弱阳性为 1~4 分，强阳性 >4 分。
1.3 观察指标（1）比较两组 NRP-1 阳性表达率。（2） 观察 NRP-1 表达情况与 ccRCC 患者临床特征的关系。
1.4 统计学方法 应用 SPSS 22.0 软件进行统计学 分析， 计数资料比较采用χ2 检验；等级资料的比较， 采用 Mann‐Whitney U 秩和检验，以 P<0.05 为差 异有统计学意义。
2 结果
2.1 两 组 NRP-1 阳 性 表 达 率 比 较 ccRCC 组 NRP-1 阳性表达率为 76.38%，明显高于对照组的 17.14%，差异有统计学意义（ P<0.05）。见表 1。
2.2 NRP-1 表达情况与 ccRCC 患者临床特征的关系临床分期Ⅲ期、 Ⅳ 期 ccRCC 患 者 NRP-1 表 达强度高于Ⅰ期、Ⅱ期； Furman 分级Ⅲ级、Ⅳ级 ccRCC 患者 NRP-1 表达强度高于Ⅰ级、Ⅱ级，差 异有统计学意义（ P<0.05）。见表 2。
3 讨论
ccRCC 是常见的恶性肿瘤，好发于人体泌尿系 统 [5] ，发病因素尚未明晰，考虑和多种药物及食品 添加剂中的致癌成分有关，同时也有学者认为其和 吸烟、酗酒等因素密切相关。ccRCC 早期诊断率较 低，且其放化疗效果不明显，早发现、早诊断、早 治疗对于改善预后有重要意义。
NPR-1 可能参与着血管生成 [6] ，相关研究发 现 [5]， NRP-1 在肿瘤浸润处及靠近浸润组织中的 表达最强，在各种癌细胞组织中， NRP-1 表达显 著， 约为癌前病变的 2~3 倍， 提示各种癌前病变中 NRP-1 表达强度与肿瘤浸润性和转移程度呈正相 关，故 NRP-1 可用来判断肿瘤的恶性程度，是理 想的预后指标。结肠癌患者的 NRP-1 表达呈阳性， 而在邻近的非恶性结肠黏膜中则不表达 [7-8]。
本研究结果显示，ccRCC 组 NRP-1 阳性表达 率明显高于健康组； 临床分期Ⅲ期、Ⅳ期 ccRCC 患者 NRP-1 表达强度高于Ⅰ期、Ⅱ期；Furman 分 级Ⅲ级、Ⅳ级 ccRCC 患者 NRP-1 表达强度高于Ⅰ 级、Ⅱ级， 提示 NRP-1 表达与 ccRCC 患者临床分期、 临床分级显著相关。分析原因为， NRP-1 能增强血 管内皮生长因子信号在细胞间的传导，帮助血管出 芽、生长，提高移动性内皮细胞水平，最终促进新 生血管生成，导致肿瘤生长，因此 NRP-1 是可以反 映 ccRCC 浸润转移程度的生物学标志，也可能成为 抗肿瘤血管生成治疗的新靶点 [9-10]。
综上所述，ccRCC 患者 NRP-1 水平高于健康 体检者， NRP-1 水平检测可作为 ccRCC 诊断的参考 依据。
参考文献
[1] 张汉荣，林吓聪，赵力，等 . NRP-1 在肾透明细胞癌中的表达及其与预后的相关性 [J]. 西南国防医药，2019，3（9）： 917-920.
[2] 鞠林成，史亚兴，张辉，等 . 肾透明细胞癌中连环蛋白 -δ的表达及临床意义 [J]. 疑难病杂志，2019，18（3）：75-78.
[3] 刘强，杨颖，王文光，等 . RNA 结合蛋白 QKI-5 在肾透明细胞癌中的表达及临床意义 [J]. 现代肿瘤医学，2019，27（3）： 88-91.
[4] 王蔚文 . 临床疾病诊断与疗效判断标准 [M]. 北京：科学技术文献出版社，2010：1411.
[5] 高永胜，闫少春，贾小娥，等 . 透明细胞肾细胞癌的表观遗传学研究进展 [J]. 中国病理生理杂志，2018，34（1）：178-182.
[6] 武卫周，王莉，单煜恒，等 . 神经纤毛蛋白 -1 靶向性分子探针在裸鼠异位脑胶质瘤分级诊断中的应用 [J]. 中华行为医学 与脑科学杂志，2019，28（4）：326-330.
[7] 马超，王卫星，苏新辉，等 . NRP-1 单克隆抗体对乳腺癌裸鼠移植瘤生长的影响 [J]. 肿瘤防治研究，2019，46（4）：29-33.
[8] 李慧敏， 王晓霞， 武美丽， 等 . siRNA 靶向 NRP-1 基因沉默经 Wnt、ROS 及 TGF-β1 途径抑制宫颈癌细胞增殖 [J]. 中国 免疫学杂志，2018，34（11）：1626-1631.
[9] 单晶莉 , 王文卿 , 徐广润 , 等 . 抗接触蛋白相关蛋白 1 抗体阳性的结旁疾病一例并文献复习 [J]. 中华神经科杂志， 2021， 54（9）：914-919.
[10] 王泽华 , 应苗法 , 赵蕊 , 等 . RNA 靶向系统 Crispr/Cas13 在分子诊断及临床治疗中的研究进展 [J]. 临床检验杂志， 2020， 38（5）：367-370.
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