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摘要：近年来临床广泛使用Genen-Xpert分子检测技术应用中使用定量PCR分子检测过程中样品的准备，核酸纯化，基因倍增，将其步骤使用把样本的制备和扩增整合成自动化程序，可以准确快速安全的得出实验结果，已成为新型分子POCT检测技术平台为感性疾病检测病原体提供新的方法，特别是在结核病中的诊断尤其重要达到早检、早诊、早治。所以介绍Genen-Xpert分子检测技术在临床中的意义和将来发展的趋势及临床应用中存在问题。
关键词：Genen-Xpert分子检测技术；肺结核；病原体检测
本文引用格式：罗妙玲.分子Gene-Xpert技术在肺结核病原体检测中的应用[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(102):192.
0引言
目前在临床中应用的胶体金免疫层析技术为代表的即时检验技术在感染病原体检测领域中广泛应用，同时该技术操作简单并逐步显示其优越性，在临床检验工作中我院在结核病检查中特别是对疑似结核和利福平耐药的患者进行检测应用，使用后临床反馈较好。现在就我院结核杆菌检测316例经行检测通过传统涂片方法和该方法检测对比显示出明显的优越性，现将上述检测过程及方法做如下分析[1-2]。
1试验材料和方法
试验所需仪器是由自治区卫计委配送的，主要仪器有Gene-Xpert检测仪和液体培养仪BD960及配套使用的试剂和一些辅助设备。方法：让符合检测标准条件的病人留取合格的痰标本2 mL左右2个样本。首先涂片检查，若为阳性则必须用液体培养的方法。若为阴性时但高度怀疑结核耐药菌时要做Gene-Xpert。最后经过统计涂片阴性的56例用Gene-Xpert技术均为阳性。技术关键点：Gene-Xpert技术操作说明书中痰和消化液的比例为1:2，在实际操作中有脓痰按其说明书中的比例实验失败。后不断总结将比例提高到1:4达到满意实验效果。由于本地区人口基数影响病员有限，经过反复尝试，试剂避免造成浪费，最合适的范围是10~12人集中一起做，液体药敏实验也可将其打开后分装于无菌1 mL冰冻管中。使用时提前解冻并用无菌加样枪头加入药敏管中。技术的关键点要注意无菌操作避免交叉污染，合格痰样的留取及液化比例和时间。准确掌握液化时间和液化比例。适用所有已诊断结核或者高度疑似结核及耐药的病人。为结核病人提供精准用药的实验依据[3-4]。临床医生严格把握适应证就会得到快速有效的诊断和治疗。
2Genen-Xpert分子检测技术在结核病诊断中的应用
我院推广和应用Gene-Xpert技术检测方法提高结核病的诊断和治疗，结核菌的培养鉴定及药敏指导临床合理用药，判断结核病的转归，与现有技术相比检测准确率提高了30%~50%。目前应用Gene-Xpert技术和液体培养两项技术共检测了634例样本。期中Gene-Xpert技术检测316例阳性153例（其中耐药30例），阳性率为48%。液体培养为318例阳性为110例，阳性率为35%。应用这项技术后明显提高结核病的实验诊断阳性率。而以前传统而单一的结核菌涂片检查阳性率只有10%~15%，且传统的固体结核菌培养需1个月的周期。而且实验诊断阳性率更低。且无法同时检测利福平耐药基因。对于治疗无效的结核病人只能经验性的判断耐药可能。临床医生严格把握适应证就会得到快速有效的诊断和治疗。应用Gene-Xpert技术和液体培养共检测634例。实验阳性诊断率分别为48%和35%。且Gene-XPert能在2 h快速检测结核杆菌和利福平耐药基因。而传统的固体培养需1个月的周期。自开展次项技术以来积极向临床推广其中Gene-Xpert技术检测316例中用传统的涂片为阴性的56例均为阳性。为临床提供实验诊断依据。此项技术能够提高实验诊断阳性率30%~50%。
3结论
此项技术对于结核患者无创伤，亦不会涉及医学伦理，不会给结核病患者造成经济负担（医保政策都给与报销）。只需要把握适应证进行严格的筛选及技术操作的培训。此项技术能够提高实验诊断阳性率30%~50%，存在的问题是：病人的依从性留痰的合格性需进一步提高。应积极向临床宣讲和推广该检测技术且临床医生能准确把握检测适应证。还应对于耐药的病人加强管理，避免重复或者无效治疗，影响实验诊断阳性率的统计。今后建议：加大临床的宣讲和推广，建议临床能开展诱导咳痰实验，加强对结核病人信息化管理和高危人群的筛查，更加有效控制结核病的传播。该试剂成本较高，望大规模使用后会降低成本。该试验阳性是需要进一步区别死菌还是活菌需进一步培养及做药敏[5]。涂片阳性的而Gene-Xpert检测阴性可能是其他型抗酸杆菌。该技术无法检测。
参考文献
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