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摘要：目的观察扶正固本汤对腹水型肝癌小鼠的Bax和Bcl-2表达的影响。方法小鼠随机分组：扶正固本汤高、中、低剂量组、环磷酰胺组、模型对照组和正常对照组，各组连续灌胃给药10天，每天1次（环磷酰胺腹腔注射给药，5天给药一次，共3次），末次给药后，取血测定Bax和Bcl-2表达。结果实验结果显示，扶正固本汤高剂量、中剂量和低剂量组能显著提高腹水型肝癌小鼠的凋亡促进基因Bax表达的水平，能显著提高降低肝癌小鼠凋亡抑制基因的Bcl-2表达的水平。结论扶正固本汤可能通过促进肝癌细胞凋亡，达到抑制肝癌细胞增长，控制肝癌组织增殖达到治疗肝癌的作用，这可能是扶正固本汤治疗肝癌的部分作用机制。
关键词：扶正固本汤；腹水型肝癌；Bax；Bcl-2
本文引用格式：庾美玲,符路娣.扶正固本汤对腹水型肝癌小鼠的Bax和Bcl-2的影响[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(82):235,239.
0引言
我国是肝癌的高发病区，目前治疗肝癌以西药为主，但西药毒副作用大、费用高，而传统的中药治疗和辅助治疗肝癌具有一定的优势，而细胞凋亡与肿瘤关系密切。本文利用腹水型肝癌小鼠，通过凋亡促进基因Bax和凋亡抑制基因Bcl-2表达，开展中药制剂扶正固本汤治疗肝癌的作用研究。
1材料与方法
1.1动物
KM小鼠和SPF级鼠料，购自广州中医药大学实验动物中心，许可证号SCXK（粤）2013-0034。本室常规喂养一周。动物实验在广州中医药大学第一附属医院SPF级动物室完成，许可证号SYXK（粤）2013-0092。
1.2药物及试剂
扶正固本汤自制，高剂量（30g/kg）、中剂量（15g/kg）和低剂量（7.5g/kg）。阳性对照药：环磷酰胺(25mg/kg），Baxter Oncology Gmbh，Bax酶联免疫试剂盒，上海酶联生物科技有限公司，Bcl-2酶联免疫试剂盒，上海酶联生物科技有限公司。
1.3仪器
酶标仪（美国Thermo Scientific公司Multiskan MK3），洗板机（美国Thermo Scientific公司Wellwash MK2），离心机（上海安亭科学仪器厂，LDL-5-A）；电子天平（上海越平科学仪器有限公司，YE20002）。
1.4方法[1]
SPF级KM小鼠随机分组：扶正固本汤高、中、低剂量组、环磷酰胺组、模型对照组和正常对照组。给药方法：扶正固本汤高、中、低剂量组：各组连续灌胃给药10天，每天1次，环磷酰胺组：环磷酰胺腹腔注射，5天给药一次，共3次。末次灌胃给药后，各组小鼠取血，测定Bax和Bcl-2。
1.5数据统计方法
用SPSS软件对数据进行统计分析，组间比较采用t检验。
2结果
2.1扶正固本汤对凋亡促进基因Bax基因表达的影响实验
与正常对照组比较，模型对照组的Bax表达的水平明显降低。与模型对照组比较，扶正固本汤高剂量、中剂量、低剂量组和环磷酰胺能显著提高腹水型肝癌小鼠的Bax表达的水平，凋亡促进基因的表达升高，显示可以促进细胞的凋亡（见表1）。
2.2扶正固本汤对凋亡抑制基因Bcl-2表达的影响实验
正常组与模型组比较，Bcl-2表达明显升高，有显著性差异（P<0.01）。与模型组比较，扶正固本汤高剂量、中剂量和环磷酰胺能显著提高降低肝癌小鼠Bcl-2表达的水平，凋亡抑制基因的降低，能促进凋亡发生（见表2）。
3讨论
细胞凋亡是一种特殊的细胞死亡类型，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等作用，是适应生存环境的主动的死亡过程，是基因控制的细胞有序的死亡。细胞凋亡家族有众多成员，它们既有抗凋亡作用，也有促凋亡的作用[2]。Bcl-2家族基因在细胞凋亡过程中发挥着重要的调控作用，Bcl-2基因具有阻遏细胞凋亡的生理功能，能延长细胞的寿命，具有保护细胞的功能，是凋亡抑制基因，bcl-2能够通过抑制线粒体破裂、结合凋亡刺激因子抑制caspase-3活化而抑制细胞凋亡的作用[3]，Bax基因是人体最主要的凋亡基因，属于Bcl-2基因家族成员，对Bcl-2基因有阻抑作用，拮抗Bcl-2基因的抑制凋亡作用，具有促进细胞凋亡的功能[4]，Bax能够间接促进释放细胞色素C、活化caspase-9蛋白而表现出促细胞凋亡的作用[5]。
细胞凋亡与肿瘤关系密切，肿瘤细胞是因为细胞凋亡受到阻碍，细胞失控的生长，不能正常进行细胞死亡清除，造成过度增殖导致的结果[6]。因此，通过细胞凋亡角度和机制可以研究肿瘤的治疗药物和治疗方法。肝癌是发生在肝脏的恶性肿瘤，我国是肝癌发病率较高的国家之一，肝癌的发病率在恶性肿瘤中排在第4位，是致死率第2的癌症。目前的治疗用药物多以西医为主，但毒副作用较大，中药与西药相比有较大的治疗优势，毒副作用小，应用前景广阔。Bax和Bcl-2二者与肿瘤的发生发展密切相关，Bcl-2表达抑制细胞凋亡[7]。
扶正固本汤是治疗肝癌的中药制剂，本文利用腹水型肝癌小鼠，研究扶正固本汤对其的Bax和Bcl-2的影响，探讨扶正固本汤治疗肝癌的作用机制。研究结果显示，扶正固本汤能显著提高腹水型肝癌小鼠的Bax表达的水平，能显著提高降低肝癌小鼠凋亡抑制基因的Bcl-2表达的水平，表明扶正固本汤可能通过促进肝癌细胞凋亡，达到抑制肝癌细胞增长，控制肝癌组织增殖达到治疗肝癌的作用，这可能是扶正固本汤治疗肝癌的部分作用机制，有待进一步的深入研究和证实。
参考文献
[1]金军,张铭熙,符路娣.蟾酥注射液对H22腹水型肝癌的抑制作用及对荷瘤小鼠生存周期的影响[J].中国中医药信息杂志,2007,14(7):40-41.
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[5]Farhadi F,Jahanpour S,Hazem K,et al.Garlic(Allium sativum)fresh juice induces apoptosis in human oral squamous cell carcinoma:the involvement of caspase-3,bax and bcl-2[J].J Dent Res Dent Clin Dent Prospects,2015,9(4):267-273.
[6]Oltvai Z N,Milliman C L,Korsmeyer S J.Bcl-2 heterodimerized in vivo with a conserved hemology,Bax,that accelerates programmed cell death[J].Cell,1993,74（13）:609-619.
[7]周元,陈橼,邵冰峰,等.Bcl_2和Beclin_1在肝癌组织中的表达及其相关性[J].现代肿瘤医学,2018,26(20):3263.
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