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摘要:目的研究分析实时荧光定量PCR法检测乙肝病毒DNA的价值分析与研究。方法选择2017年7月到2018年12月我院治疗的乙型肝炎患者200例,采用血清标志物方法实施疾病检验最后确诊,对所有乙型肝炎患者采用荧光定量PCR法进行检测,分析最终的检测结果。结果选择荧光PCR方法对乙肝病毒DNA进行检测,同时选择普通血清学标志物检测乙肝病毒DNA数据进行比较,结果较一致,但选择荧光PCR方法检测结果更为准确。在临床大三阳检测中检出率大96%,小三阳检测中检出率为69%,对乙型肝炎表面抗体、乙型肝炎E抗原、的监护率为2%。结论硬性肝炎患者采用实时荧光定量PCR法检测乙肝病毒DNA能够获得乙型肝炎病毒准确结果,能够得到理想结果值得在对临床中广泛推广。
关键词:荧光定量PCR法检测;乙肝病毒DNA;临床价值
本文引用格式:杨秀丽,李振勤,刘晓荣,等.实时荧光定量PCR法检测乙肝病毒DNA的价值分析与研究[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(101):217+220.
0引言
乙型肝炎为常见的感染性疾病,主要因为患者在感染乙型肝炎病毒后发生的肝脏炎性病变,最后会导致肝硬化、肝癌等严重并发症,直接威胁患者生命[1]。传统临床对于乙型肝炎病毒携带者的检测多选用血清血标志物法,主要检测样本为患者血液。在临床血清学检测过程中会因操作失误导致检测人员感染的情况[2]。为了保证乙肝患者检测结果的准确性,本次研究采用实时荧光定量PCR法对乙肝病毒DNA进行检测评价该方法在临床检查中的应用价值,现进行报道。
1资料和方法
1.1临床资料。选择我院2017年7月到2018年12月治疗的乙型肝炎患者200例为本次研究对象,患者年龄在26-54岁之间,平均年龄36.4岁,其中男性125例,女性75例。
1.2纳入与排除标准。纳入标准:患者经诊断确诊为乙型肝炎患者,在入组治疗前未进行抗病毒治疗,自愿接受接受本次研究,签订知情同意书[3]。排除标准:患有其他类型肝炎患者,患有精神疾病神志不清患者,存在恶性肿瘤或严重心血管疾病患者。
1.3检测方法。所有患者在晨起空腹抽取静脉血5 mL,在进行高速离心后进行进行血清血标志物法检测,采用ELISA定量检测方法,测定乙肝E抗体、乙肝核心抗体、乙肝表面抗原、乙肝表面抗体、乙肝e抗原;采用标准RT-PCR检测乙肝病毒DNA(HBV-DNA),取血清样本混合450 ul DNA提取液,在恒温水浴中预热10 min,再冰冻性,将上清液放置到PCR管内,仪器设定程序后再进行检测,检测结束后以Ct值为标准做荧光线,根据Ct值计算出DNA含量,所有操作均按照说明书严格执行。
1.4疗效评价。显效:选择荧光定量PCR法对乙肝病毒完成检测,与血清血标志物法检测结果比较,结果一致并且在PCR检测发后能够确定乙肝病毒数据,能够得到较高的拷贝数[4];效果不明显:临床采用荧光定量RCP方法进行检测后与血清学标志物检测结果比较,准确度无为突出表现;无效:采用两种方法对乙肝病毒进行检测后,荧光定量PCR法检测数据结果更为准确。
2结果
选择荧光PCR方法对乙肝病毒DNA进行检测,同时选择普通血清学标志物检测乙肝病毒DNA数据进行比较,结果较一致,但选择荧光PCR方法检测结果更为准确。在临床大三阳检测中检出率大96%,小三阳检测中检出率为69%,对乙型肝炎表面抗体、乙型肝炎E抗原检出率为2%,证明事实乙肝病毒DNA检测采用荧光定量PCR法具有显著疗效。
3讨论
乙型肝炎在消化内科中属于较为常见的感染性疾病,主要发病部位在肝脏,乙肝直接威胁患者的健康和生命安全[5-8]。乙肝作为传染性疾病以学业传染为主,预防主要途径预防与患者血液接触。根据乙肝病程长短可分为慢性乙型感染和急性乙型肝炎,与慢性乙型感染比较急性肝炎对患者影响较大,并且相关并发症能够直接威胁患者生命安全。根据患者病情的严重程度可分为活动性乙型肝炎、乙肝携带、重型肝炎患者、肝炎肝硬化患者等。在对血清检测过程中采用荧光定量PCR法检测能够获得较好的检测效果,并且可重复性较好,能够有效观察抗病毒药物在治疗过程中的效果。通过自动检出仪器,对荧光信号的积累,对PCR开展实施监控,从而测定患者微量HBV-DNA。
对于血清乙肝DNA检测可选择荧光定量PCR法获得较好检测效果,并且该方法具有较好的重复性,可作为乙肝在临床治疗过程中疗效观察的有效检测方法。实时荧光定量PCR检测法包括普通PCR的引物、荧光基团、荧光染料等,对于此类荧光物质在特定波长下能够作为荧光探针。在PCR检测过程中仪器通过对荧光信号积累的检测,可对PCR进行实时监测,可作为荧光阈值的坐标,并且方便微量乙肝DNA病毒的检测,获得准确的临床检验结果。
综上所述,对于乙肝患者乙肝病毒DNA检测与血清血标志物法检测结果比较,能够获得较为准确的检测结果,并且综合信息较全面,为患者临床乙型肝炎患者临床研究方案提供临床数据依据,证实乙型肝炎患者选择荧光定量PCR法能够准确检测乙肝MNA病毒并保证有效的临床检测准确性。
参考文献
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