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摘要:目的探讨分析神经生长因子(NGF)和前列腺素F2α受体(PTGFR)分别在子宫腺肌病相关组织的表达情况。方法采用免疫组化法检测病例组宫体组织及宫颈组织中NGF、PTGFR的表达强度,并与对照组对比。结果病例组宫体组织中NGF、PTGFR表达均高于对照组,且差异有统计学意义;病例组宫体组织中NGF及PTGFR表达均高于宫颈组织且差异有统计学意义;病例组与对照组宫颈组织中NGF及PTGFR表达水平差异无统计学意义。结论NGF、PTGFR在子宫腺肌病痛经患者宫体组织中异常高表达,可能与痛经发生相关,但在宫颈组织表达无增加,推测与痛经的关系不大。
关键词:神经生长因子;前列腺素F2α受体;子宫腺肌病
本文引用格式:柴亚娟,申英,张秀艳,等.NGF和PTGFR在子宫腺肌病相关组织的表达情况[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(100):132-133.
0引言
子宫腺肌病是妇科常见病,临床上多见于经产妇,以继发性痛经为主要临床表现,常伴有经期延长及经量增多。据不完全统计,子宫腺肌病痛经发生率约为30.0%至77.8%[1],严重影响患者的生活质量。
子宫腺肌病痛经的发生机制与炎症反应、子宫肌层异常收缩密切相关[2]。子宫腺肌病患者异位内膜周期性的变化常诱发疼痛介质,其中常见的致痛物质包括缓激肽、前列腺素(PG)和神经生长因子(NGF)。NGF在疼痛、神经可塑性和炎症因子释放等方面起着关键作用。相关文献研究表明,PGF2a与原发性痛经及子宫内膜异位症导致的继发性痛经均有密切关系[3]。
对于没有生育要求的痛经女性,子宫切除为黄金标准疗法[4],其中根治性治疗方法是全子宫切除术[5]。但是随着时代的进步,人们对维持正常盆底支撑功能、提高生活质量的要求日益增高[6],越来越多的患者难以接受全子宫切除手术,而倾向于选择次全子宫切除术,但是次全子宫切除术后可能仍存在周期性腹痛的隐患。
1资料与方法
1.1资料来源。选择承德市中心医院妇产科2016年1月至2017年6月因逐渐加重的进行性痛经行全子宫切除术,术后经病理学确诊子宫腺肌病的30例患者的组织蜡块为病例组,并选取同期因其它原因行全子宫切除术,术后经病理学确诊子宫腺肌病无痛经的30例患者的组织蜡块作为对照组。分别选取两组包埋子宫内膜、异位内膜、肌层组织、宫颈组织的蜡块。
1.2免疫组化法检测NGF、PTGFR。步骤如下:①将石蜡标本切成厚4 um的薄片3张,1张HE染色核实诊断,另2张用于免疫组化试验。②在二甲苯和不同浓度酒精中进行脱蜡,脱水。③抗原修复(高压锅用柠檬酸溶液大火煮沸2分钟)。④3%过氧化氢水溶液,室温孵育5-10 min。⑤用5%-10%正常山羊血清工作液封闭,室温孵育10 min,然后滴加1:300稀释的一抗兔抗人前列腺素F2a受体多克隆抗体、1:300兔抗人神经生长因子单克隆抗体,在4℃过夜。⑥PBS冲洗,2分钟×3次。⑦滴加二抗孵育20分钟。⑧PBS冲洗,2分钟×3次。⑨显色剂显色10分钟,用自来水冲洗,再染,脱水透明,封片以及观察。
1.3结果判读。细胞胞浆出现棕黄色颗粒标记为阳性。在200倍显微镜下随机计数5个视野。根据着色细胞面积和着色强度综合评分:着色面积:<5%评0分;5%~25%评1分;26%~75%评2分;>75%评3分。着色强度:无着色评0分;着色为淡黄色评1分;着色棕黄色评2分;着色棕褐色评3分。每张切片得分=(着色细胞分数+着色强度分数)/2,根据所得分值分为4个等级:分数<0.5分为(-),0.6~1.4分为(+);1.5~2.4分记为(++);≥2.5分记为(+++)。
1.4统计学处理。用SPSS 21.0软件对数据进行统计分析,计量资料以(±s)描述,组间比较采用两独立样本的t检验;等级资料用例数描述,两组间比较用两独立样本的Wilcoxon秩和检验;组内不同部位比较采用Friedman M检验及两两比较的q检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
病例组在位内膜中NGF、PTGFR的表达高于对照组且差异有统计学意义;病例组异位内膜中NGF、PTGFR的表达高于对照组且差异有统计学意义;病例组肌层组织中NGF、PTGFR的表达高于对照组且差异有统计学意义;病例组宫体组织NGF表达明显高于宫颈组织(M=73.110,P<0.001);病例组宫体组织中PTGFR表达明显高于宫颈组织(M=81.000,P<0.001);病例组与对照组宫颈组织中NGF、PTGFR表达水平之间差异无统计学意义,见表1、表2。
3讨论
大量研究表明,NGF在子宫内膜异位症和子宫腺肌病中均有异常表达,且NGF的水平随着疾病的严重程度而增加[7-9]。有相关报道,痛经的子宫腺腺肌病患者在位内膜,异位内膜和肌层组织中的神经纤维密度明显高于无痛经组。Blaney等亦指出,异位内膜中NGF异常高表达与神经纤维植入密度呈正相关[10]。
有研究认为,子宫合成PGF2a增加,是原发性痛经的重要原因。类似于正常子宫内膜,异位子宫内膜也可产生PGF2a。PGF2a可通过直接或间接途径引起痛经。一方面,通过作用于子宫螺旋小动脉壁上的PGF2a受体(PTGFR)引起子宫平滑肌收缩导致子宫血流量减少,表现为缺氧和痛经。另一方面,炎症组织中的环氧合酶被激活,促进局部PGF2a的增加,提高痛觉感受器的敏感性,导致痛觉产生。PGF2a也可以通过直接刺激传入神经纤维引起痛经。
因此,本实验通过检测NGF和PTGFR分别在子宫腺肌病患者子宫不同部位的表达情况,发现:NGF、PTGFR在子宫腺肌病痛经患者宫体组织中异常高表达,但在宫颈组织中呈低表达,且NGF、PTGFR在子宫腺肌病痛经患者宫体组织中表达明显高于宫颈组织,说明痛经可能主要与两者在宫体组织中的高表达有关,而与在宫颈组织中的低表达关系不大。故推测,对于倾向保留宫颈的子宫腺肌病患者,行次全子宫切除术具有可行性,术后发生周期性腹痛的可能性不大。
参考文献
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