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摘要：阴道炎是妇女常见妇科疾病,病因复杂、发病率和复发率高、流行范围广、难根治，因此正确的治疗尤为重要，而正确的治疗依赖于准确的诊断,实验室的精确检测能为临床医师提供诊疗依据。阴道微生物核酸检测技术的应用使阴道炎诊断进入了分子诊断领域。本文就近年来对3种常见阴道炎诊疗方面的进展进行综述。
关键词：阴道微生物核酸；阴道炎
本文引用格式：于桥爱，张流，朱书宇.阴道微生物核酸检测在妇女阴道炎诊疗中的应用[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(93):46-47.
The Vaginal Microbial Nucleic Acid Detection in Diagnosis and Treatment of Vaginitis in Fertile Woman
YU Qiao-ai,ZHANG Liu,ZHU Shu-yu
(Liuzhou maternal and child health hospital,Liuzhou Guangxi)
ABSTRACT:Vaginitis is a kind of common gynecological disease among fertile woman.Because of its complicated etiology,high incidence and recurrence,wide epidemic trait.Therefore,correct treatment is particularly important.Accurate laboratory detection can provide clinicians with a basis for diagnosis and treatment.Then,the application of vaginal microbial nucleic acid detection technology has brought the diagnosis of vaginitis into the field of molecular diagnosis.The article reviews advances in diagnosis and treatment of three common vaginitis in recent years.
KEY WORDS:Vaginal microbial nucleic acid;Vaginitis
0引言
阴道炎是妇女常见妇科疾病[1-2]，70%的女性一生中都会感染阴道炎[3-4]。阴道炎的三个主要类别是细菌性阴道炎（BV）、念珠菌性阴道炎（VVC）、滴虫性阴道炎（TV）[5]，其中混合感染与重复感染占30%[6]。阴道炎的发生可造成宫颈炎、盆腔炎、子宫内膜炎、泌尿系统感染、增加HIV感染风险、不孕不育、组织性绒毛膜炎、流产、早产及新生儿死亡等不良结局的发生[7-10]。据美国相关资料显示，因为外阴阴道念珠菌病而带来的复诊成本高达31亿美元[11]，由BV感染引起的流产、早产、低体重儿造成16.7亿美元成本[12]。因此能同时准确、快速地检测三种常见阴道炎病原菌在临床阴道炎诊疗中尤为重要。近年来阴道炎分泌物检测方法的灵敏度和特异性不断提高，目前更是进入了分子诊断时代，阴道微生物核酸检测技术已广泛应用于临床。本文就近年来对常见阴道炎实验室检测方法进展进行综述。
1阴道炎病原体常用检测方法
1.1镜检法
镜检法较为常用的有生理盐水涂片湿片镜检法和革兰氏染色干片镜检法。生理盐水涂片湿片镜检法是将病人的阴道分泌物标本与生理盐水混匀，涂抹于载玻片上，盖上盖玻片，置于普通显微镜或超高倍显微镜下对霉菌、滴虫和线索细胞等进行观察，而普通显微镜由于放大倍数的限制检查不出线索细胞。革兰氏染色干片镜检法是将阴道分泌物样本涂抹在载玻片上，干燥、固定，然后用结晶紫初染，约一分钟后水洗；再用碘液进行媒染约一分钟后水洗；然后用９５%酒精脱色至刚刚不出现紫色时为止，约20-30秒，水洗；最后用番红复染后水洗，待干燥后置于油镜下观察。湿片镜检法操作简单、方便、快速，但是影响因素较多，对阅片者经验要求较高，同一份取材样本,一个检验师反复几次涂片检查,可获得不一样的检验结果；几个检验师对同一份取材样本进行涂片检查,也有可能获得不一样的检验结果，加上镜检的阅片视野有限，易漏检和误检，敏感性和特异性低[13-15]。革兰氏染色镜检法操作较繁琐，染色效果易受染色时间、环境温度，染液浓度、染料沉渣和个人染片操作技术等因素的影响，最终影响检验结果。
1.2干化学法
干化学法通过病原菌产生的酶的化学反应显色来间接反应病原菌的存在。唾液酸苷酶(SNA)、脯氨酸氨基肽酶(PIP)和白细胞酯酶(LE)临床用于判定阴道是否存在细菌性阴道病。乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)临床用于判定阴道是否存在滴虫性阴道炎、念珠菌性阴道炎。氧化酶(OA)临床用于判定阴道是否存在非特异性阴道炎。pH值临床用于区分滴虫性阴道炎、念珠菌性阴道炎。干化学法操作简单，操作过程中人为影响因素较少，结果判定容易，但是由于阴道分泌物微生物等成分较多，特别是当患者处于混合感染的时候，阴道分泌物成分复杂、PH值、酶量或酶活力改变等，均可导致酶学反应受到干扰，其敏感性和特异性低[16-17]，易造成漏诊和误诊。
1.3培养法
培养法应用于阴道炎的诊断，被誉为“金标准”，敏感性和特异性高，但是操作复杂，出报告周期长，收费较高，需要特定的仪器设备，对检验人员和检验环境要求高，不适用于基层单位和门诊病人的筛查。念珠菌属于条件致病菌，存在于正常人阴道中，据统计约有10-20%在临床上是念珠菌培养阳性而无临床症状，无需进行临床治疗者[18]。
2阴道微生物核酸检测技术的临床应用
目前最新应用的BD AffirmVPⅢ基因芯片法是以核酸杂交原理为基础，主要是将待测标本进行裂解，并在试剂槽中分别于包含有相应捕获探针分析卡机试剂中的显色探针相结合最终根据每一个目标微生物微球的显色结果进行判读，通过DNA探针技术直接检测阴道分泌物中的阴道加德纳菌、念珠菌和阴道毛滴虫的核酸，可同时诊断BV、TV、VVC。其检验过程简单，概括为3步:
(1)样本制备;(2)自动化DNA含量测定;(3)检测结果判读。BD AffirmTM VPIII阴道微生物核酸检测快速、操作方便简单、仪器自动化处理且检测结果不受杂菌、生理期、阴道用药、混合感染等影响，避免了个人主观性因素、环境因素、保存条件时限等因素的影响并对合并感染检测有优势，其检测结果与“金标准”Nugent评分法和培养法一致性良好，敏感性和特异性高[19-20]，该方法检测念珠菌时阳性阈值为10 4 CFU/mL阴道液，可有效避免念珠菌培养假阳性结果。
3小结
一直以来妇女阴道炎的病发率越来越高，给病患造成了极大的身心痛苦、精神压力和经济压力。阴道分泌物检测至今一直主要应用显微镜镜检技术，没有突破和创新，干化学酶法和培养法本身又有局限性。因此期待阴道微生物核酸基因芯片检测技术的开展能为临床提供阴道炎病原菌的高检出率和准确性，为临床提供精准的诊疗依据，减少临床误诊、漏诊，更好地服务于病人。
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