自身免疫性肝炎患者血清补体C3和&的临床检测意义论文

SCI论文（www.lunwensci.com）:

【摘要】目的评价补体C3、C4在自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)的临床检测意义。方法选取2011年5月-2013年12月于奉节县人民医院就诊的AIH患者90例，其中活动期45例，缓解期45例。采用间接免疫荧光法检测患者抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(SMA)、抗线粒体抗体(AMA)的表达，全自动生物化学分析仪检测患者的肝功能生化指标，散射比浊法检测患者外周血中的补体C3.C4 JgGJgA JgM的表达水平，肝脏穿刺病理组织检测判断其炎性活动水平。然后分析AIH患者C3、C4水平与炎症活动程度的关系。结果C3、C4在A1H活动期表达水平［(0.89±0.05)g/L、(0.16±0.03)g/L］显著低于缓解期表达水平［(1.12±0.06)g/L,(0.23±0.04)g/L,P<0.01］；C3表达水平与AST(r=-0.248,P=0.000)、TBIL(r=-0.372,P=0.003)、DBIL(r=-0.471,P=0.012)呈负相关；C4表达水平与AIH活动期患者肝脏病理组织穿刺的HAI病理评分呈负相关(r=-0.635,P=0.000)o结论AIH活动期患者补体C3.C4表达水平下降，可通过对其检测辅助评估肝脏炎性活动程度：

【关键词】自身免疫性肝炎；补体C3；补体C4

Diagnostic value of complement C3 and C4 in patients with autoimmune hepatitis

XIE Yi

Department of Laboratory,the People*s Hospital of Fengjie County,Chongqing 404600,China

[Abstract]Objective To evaluate the diagnostic value of complement C3 and C4 in patients with autoimmune hepatitis(AIH).Methods Ninety patients with AIH were selected,45 cases in active stage and 45 cases in remission stage.Indirect immune fluorescence was used to test the expression levels of ANA,SMA and AMA.The indexes of hepatic function were tested by automatic biochemical analyzing equipment.Scatter turbidimetry was used to measure the serum levels of C3,C4,IgG,IgA,IgM and liver biopsy was performed to assess the inflammatory activity.Then the relationship of C3,C4 with the inflammatory activity was analyzed.Results The expression levels of C3,C4 in the active stage of AIH were much higher than those in the remission stage[(0.89±0.05)g/L,(0.16±0.03)g/L vs(1.12±0.06)g/L,(0.23±0.04)g/L,P<0.01].C3 was negatively related with AST(r=-0.248,P=0.000),TBIL(r=-0.372,P=0.003)and DBIL(r=-0.471,P=0.012),there was a negative correlation between HAI and the levels of C4 are(r=-0.635,P=0.000).Conclusion The expression levels of C3,C4 are declined significantly in the active stage of AIH,and they have complementary diagnostic value for AIH.

[Key words]Autoimmune hepatitis；Complement C3；Complement C4

自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)是一*种危害人类健康的慢性进行性炎症肝病，具体表现为波动性肝炎或肝功能衰竭，其原因可能是遗传易感性基础上自身免疫耐受受到破坏，自身免疫反应引起肝内实质细胞损伤⑴。目前，我国AIH的检出率呈上升趋势，且临床观察发现其在女性中的发病率明显高于男性。由于AIH发病有时并不表现任何症状*1,所以，及时诊断评估患者的病情在临床上具有重要意义。补体系统是机体天然免疫的重要组成部分，广泛参与机体的免疫调节和炎症反应⑷。补体C3、C4主要由肝细胞合成，但其表达水平是否与AIH炎症活动程度有关，目前尚不十分清楚。本研究通过检测AIH患者补体C3、C4的表达水平与其他相关指标的相关性，评价其是否能在临床上辅助AIH的诊断，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料选取2011年5月-2013年12月于奉节县人民医院就诊的AIH患者90例，其中治疗前45例(活动期)，男10例，女35例，平均年龄(52.3±14.6)岁；激素治疗后缓解45例(缓解期)，男8例，女37例，平均年龄(51.7±15.3)岁，两组的男女比例和年龄构成相比，差异无统计学意义(F>0.05),具有可比性。AIH诊断以1999年修订的AIH描述性诊断和评分系统为标准，治疗前积分>15或治疗后>17则诊断为AIH,计分在10~15则为疑似患者⑴。缓解期患者以治疗后血清转氨酶和胆红素水平均达到正常水平>6个月为标准⑹。

1.2仪器与试剂HE染色试剂盒(博士德)，全自动生物化学分析仪(贝克曼库尔特)，间接免疫荧光试剂盒（欧蒙医学实验诊断有限公司）。

1.3诊断方法所有患者于清晨空腹抽取静脉血2 ml,离心后收集血清，待检。（1）间接免疫荧光法检测患者抗核抗体（ANA）、抗平滑肌抗体（SMA）、抗线粒体抗体（AMA）。选用HEp-2和猴肝脏、心肌，大鼠的肝、肾、胃组织的冰冻切片作为抗原，应用生物薄片马赛克技术将以上切片组合成一个反应区。免疫印迹法检测抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体（抗-SLA/LP）,具体如下：将重组表达抗原包被在硝酸纤维素膜上后，在样本反应区加入稀释的血清，室温孵育30 min后洗膜，加二抗孵育30 min后，依次进行洗膜、显色。（2）采用全自动生物化学分析仪分别对各个患者的肝功能生化指标进行检测。所检测指标有：谷氨酸转移酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、寸谷氨酰转肽酶（GGT）、碱性磷酸酶（ALP）。（3）采用散射比浊法分别检测各个患者外周血中补体C3、C4和IgG JgA JgM的表达。（4）在患者签署知情同意书的前提下，在B超指引下用肝穿针对患者进行肝脏穿刺，收集肝穿针中的肝脏组织进行病理组织检测。组织经固定、包埋、切片后进行常规HE染色，并对其炎症活动进行组织炎症活动指数评分（HAI）。

1.4统计学分析应用SPSS 17.0软件包进行统计学分析。计量资料以%±5表示，组间比较采用，检验，计数资料采用/检验，相关性分析采用直线相关分析。尸<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1 AIH患者资料分析活动期患者出现不同程度的肝功能异常，其IgG表达升高旦检测出多种自身抗体表达。缓解期患者肝功能和IgG表达水平基本恢复正常，而自身抗体阳性比例和滴度均无明显变化（见表1）。




2.2AIH活动期与缓解期患者补体C3、C4表达水平的比较补体C3在活动期患者外周血中的表达（0.89±0.05）g/L较缓解期患者（1.12±0.06）g/L明显降低，差异有统计学意义（«=2,806,P<0.01）；C4的表达变化趋势与C3相似，即活动期患者外周血中表达（0.16±0.03）g/L较缓解期（0.23±0.04）g/L低，差异有统计学意义（t=4.231/<0.01）。

2.3AIH患者C3、C4水平与肝功生化指标的相关性经相关性分析得出C3表达水平与AST、TBIL、DBIL
呈负相关，差异均有统计学意义（r=-0.248、-0.372、-0.471,P=0.000,0.003,0.012）；C3与ALT、ALP、GGT等指标无明显相关性（r=0.083、0.042,0.175,P=0.562、0.751、0.708）；C4与AST、TBIL、DBIL、ALT、ALP、GGT均无相关性（r=0.052、0.068,0.019,P=0.073、0.069、0.059）。

2.4活动期AIH患者外周血C3、C4表达水平与肝脏穿刺病理监测的相关性对20例活动期AIH患者进行肝脏穿刺病理检査及HAI评分，C3、C4表达低于正常值（0.88 g/L和0.16 g/L）与高于正常值的HAI评分相比，差异无统计学意义（尸>0.05）。相关性分析表明C4与HAI评分之间呈负相关（『=-0.635,P=0.000,见表3）。





3讨论

补体是机体免疫系统的重要组成部分，经活化后具有特殊活性，可介导免疫应答和炎症反应。其在正常情况下表达量相对衡定，在某些疾病情况下则可能会出现一定波动⑺。所以临床上常通过检测补体的成分、含量来对某些疾病进行辅助诊断和病情评估庭）。肝脏是补体合成的主要器官，其合成量约占总体的90%,所以肝功能与补体表达水平密切相关。目前已有报道在乙型肝炎患者、肝癌患者"財3〕外周血中C3、C4的表达水平随肝组织炎性活动和纤维化程度的升高而逐步降低，但是其在AIH患者中的变化暂时鲜有报道。

本研究结果显示A1H患者活动期补体C3、C4表达水平明显低于缓解期，这可能是由于AIH活动期补体存在过度激活，同时由于肝功能下降，存在补体合成能力下降的问题。补体的激活与AIH的炎性活动具有相关性，这与前人的研究相一致5〕。C3在补体激活过程中处于中心位置，不论是经典激活途径还是旁路激活途径后续补体成分的连锁反应均建立在C3激活的基础之上，所以C3表达水平的高低与补体总体水平具有相关性，而且其表达水平也可作为体液免疫的重要指标31。通过相关性分析，显示AIH患者C3表达水平与肝功能指标AST、TBIL、DBIL呈负相关。因为C3的下降可反映补体的激活水平，所以可通过检测C3表达水平判断肝脏生化指标的异常变化。同时，C4水平与HAI评分呈负相关，所以C4表达水平可作为评价AIH患者肝脏炎性活动程度的指标。

综上所述，AIH患者活动期C3、C4的表达水平可反映肝脏的炎性活动水平，通过检测C3、C4在外周血中的表达水平可辅助评价AIH患者病情。

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