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【摘要】 目的：比较金胺“O”荧光染色法与萋 - 尼染色法在肺结核细菌学检验中的应用效果。 方法： 选取 144 例肺结核患者为 研究对象，按照随机数字表法分为对照组和观察组各 72 例，两组均取痰液样本行肺结核细菌学检验，对照组采用萋 - 尼染色法，观察组 采用金胺“O”荧光染色法，比较两组结核分枝杆菌阳性检出率和检验时间。 结果： 观察组阳性检出率为 88.9%（64/72） ，高于对照组的 55.6%（40/72）， 差异有统计学意义（ P<0.05）； 观察组检验所需时间为（31.06±4.51）min， 短于对照组的（46.38±5.23）min， 差异有 统计学意义（t=18.823， P=0.000）。 结论： 金胺“O”荧光染色法在肺结核细菌学检验中可提高结核分枝杆菌阳性检出率，缩短检验时间， 优于萋 - 尼染色法检验效果。
【关键词】 肺结核；结核分枝杆菌；金胺“O”荧光染色法；萋 - 尼染色法；细菌学检验；阳性检出率
结核分枝杆菌是结核病的病原菌，该病菌可侵 犯全身各组织器官，以肺部感染最多见，严重影响身体健康和生命安全 [1-2]。细菌学检验是临床诊断 肺结核患者的重要方式， 尤以抗酸染色法最为常见， 其检验的特异度较高 [3-4] 。本文比较金胺“O”荧 光染色法与萋 - 尼染色法在肺结核细菌学检验中的 效果。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取 2017 年 1 月至 2020 年 12 月 本院收治的 144 例肺结核患者为研究对象。纳入标准： 符合肺结核诊断标准 [5]； 病情稳定。排除标准： 合并心、肝、肾等器官功能障碍；合并凝血功能障 碍。患者对本研究内容了解并自愿签署知情同意书， 且本研究经本院伦理委员会审核通过。按照随机数 字表法分为对照组与观察组各 72 例。对照组：男 41 例，女 31 例；年龄 32~79 岁，平均（57.3±5.8）岁； 病程 1~8 年， 平均（3.2±0.6） 年。观察组： 男 44 例， 女 28 例； 年龄 30~78 岁， 平均（57.5±5.6）岁； 病程 1~9 年， 平均（3.4±0.5） 年。两组一般资料 比较，差异无统计学意义（ P>0.05），有可比性。
1.2 方法 所有患者留取痰液标本前均采用生理 盐水彻底漱口，从深处咳痰，采用无菌塑料标本盒 收集痰液标本。检测操作开始前在痰液标本中加入适量胰酶消化液，并给予一段时间的水浴，然后加 入适量氢氧化钠溶液，振荡混合处理。经过处理之 后的痰标本以 3000 r/min 转速， 离心半径 10 cm 离 心 10 min，将沉淀物均匀涂抹在玻片上，涂抹成约 10 mm ×20 mm 的椭圆形痰膜，每份标本涂片２张， 将涂好的痰片室温下干燥后于５ s 内进行酒精灯火 焰固定。
对照组采用萋 - 尼染色法实施细菌学检验。按 照《中国结核病防治规划痰涂片镜检标准化操作及 质量保证手册》[6] 中相关规定进行初染、脱色、复 染等操作。
观察组采用金胺“O”荧光染色法实施细菌学 检验。初染： 将固定处理后的玻片放置在染色架上， 滴加 0.1% 的金胺“O”染色液覆满玻片，放置 15 min；脱色：用自来水缓慢冲去初染液， 滴加 0.5% 的盐酸乙醇脱色 2 min，直至外观没有黄色为止； 复染：用自来水缓慢冲去脱色液，滴加 0.5% 的高 锰酸钾复染液覆满玻片，１ min 后用自来水缓慢冲 去复染液，将玻片沥干水分，晾干之后待检。
镜检：萋 - 尼染色涂片应用生物显微镜进行镜 检，以 100× 油镜进行观察，蓝色背景下结核分枝 杆菌呈现为红色杆状。金胺“O”荧光染色法应用 荧光显微镜进行镜检，以 20× 物镜计数， 40× 物 镜对结核分枝杆菌菌体形态进行观察，在暗色背景 下，结核分枝杆菌发出黄绿色荧光，菌体则呈现为 短棒状或杆状略弯曲。
1.3 观察指标 （1）比较两组结核分枝杆菌阳性 检出率。（2）比较两组检验所需时间。
1.4 统计学方法 采用 SPSS 22.0 统计学软件处理 数据，计量资料比较采用 t 检验， 计数资料比较采 用 χ2 检验，以 P<0.05 为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组结核分枝杆菌阳性检出率比较 观察 组阳性检出率为 88.9%（64/72）， 高于对照组的 55.6%（40/72）， 差异有统计学意义（ χ2=19.938， P=0.000）。
2.2 两组检验所需时间比较 观察组检验所 需 时 间 为（31.06±4.51）min， 短于对照组的 （46.38±5.23）min， 差异有统计学意义（t=18.823， P=0.000）。
3 讨论
结核病细菌学检查是临床公认的诊断结核病的 重要依据 [7] 。金胺“O”荧光染色法和萋 - 尼染色 法的检测原理基本相同，都是利用结核分枝杆菌具 有的嗜石炭酸性，在染色剂当中加入一定量的石炭 酸， 使其成为一种媒染剂 [8]。萋 - 尼染色法是目前 临床上常用的一种细菌学检测方法，经过染色处理 之后的分枝杆菌呈现红色，而其他的细菌呈蓝色， 但该检测方法时间相对较长， 且阳性检出率较低， 只有当细菌的浓度达到较高水平（10 000 个 /mL） 的时候才能够被检测出 [9] 。金胺“O”荧光染色法 是通过适当的加热处理，使荧光染料渗入到结核分 枝杆菌菌体中，从而使结核分枝杆菌在暗背景下呈 黄绿色的荧光。本研究结果显示，观察组结核分枝 杆菌阳性检出率高于对照组；检验所需时间短于对 照组。
综上所述，金胺“O”荧光染色法在肺结核细 菌学检验中可提高结核分枝杆菌阳性检出率，缩短 检验时间，优于萋 - 尼染色法检验效果。
参考文献
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[9] 毛小芳， 杨敏， 谢英， 等 . 金胺“O”荧光染色 LED 显微镜检测痰中抗酸杆菌的应用 [J]. 实验与检验医学， 2016， 34（1）： 82-83.
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