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摘要：目的探究恒温核酸扩增芯片法在下呼吸道病原体检测中的应用价值。方法2018年10月至2019年3月，本院收集下呼吸道感染患者的病原体样本244例，分别给予恒温核酸扩增芯片法、病原体分离和培养、荧光定量PCR技术进行病原体检测，分析244例病原体样本的检测结果。结果244例病原体标本检出126例下呼吸道病原体，其中痰液病原体检出率比肺泡灌洗液检出率高（P<0.05）。共检出12种病原菌，种类以流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌为主。60岁以上患者的铜绿假单胞菌检出率较高18岁以下患者的流感嗜血杆菌检出率较高（P<0.05）。恒温核酸扩增芯片法的检出率高于病原体分离、培养阳性检出率（P<0.05）。结论下呼吸道病原体检测应用恒温核酸扩增芯片法检测，高效快速，值得应用。
关键词：恒温核酸扩增芯片法；病原体分离和培养；荧光定量PCR技术；下呼吸道病原体检测；流感嗜血杆菌
本文引用格式：王胜,李仁杰,朱敏,等.恒温核酸扩增芯片法在下呼吸道病原体检测中的应用[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(95):202+204.
0引言
下呼吸道感染属于临床常见感染疾病，也是导致人类死亡的主要原因之一。现今最有效的诊断下呼吸道感染的方案仍是细菌培养法，但是耗时较长，敏感性较低[1]。近年来，有研究发现，恒温核酸扩增芯片法在下呼吸道感染的诊断中应用，具有显著疗效[2]。本研究探究分析了恒温核酸扩增芯片法在下呼吸道病原体检测中的应用价值，现报告如下。
1资料与方法
1.1临床资料。2018年10月至2019年3月，本院收集下呼吸道感染患者的病原体样本244例，男165例，女79例；年龄在2-78岁，平均（40.28±3.24）岁。其中60岁以上患者128例，18-60岁患者44例，18岁以下患者72例。
1.2方法。仪器与试剂：呼吸道病原菌核酸检测试剂盒（恒温核酸扩增芯片法）（百康芯（天津）生物科技有限公司）；百康芯（天津）生物科技有限公司生产的恒温核酸扩增分析仪；法国梅里埃公司生产的VITEK2-compact细菌鉴定药敏仪、巧克力平板、哥伦比亚血平板；珠海贝索生物技术有限公司生产的革兰染色试剂。检测方法：①筛选痰标本，调取标本粘液、痰液、脓液，革兰染色后进行镜检，进行初步筛选，低倍镜下多形核白细胞大于25/LP，鳞状上皮细胞小于10/LP的可以纳入研究。②痰培养：将合格痰标本接种在哥伦比亚血平板、巧克力平板，在二氧化碳浓度5％，温度35℃的环境下培养24小时或48小时，分纯后鉴定致病菌。③恒温核酸扩增芯片法检测，按照试剂盒说明书，进行核酸提取、加样、检测，最后判读结果。
1.3统计学分析。所有研究数据均应用SPSS 17.0统计学软件进行统计分析，P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1病原菌检出情况。244例病下呼吸道感染标本中，痰液标本180例，肺泡灌洗液标本64例。244例标本中检出126例下呼吸道病原体，阳性率51.64％。其中单一感染110例，混合感染16例。痰标本检出96例，肺泡灌洗液检出标本30例。244例病原体标本的痰液病原体阳性率比肺泡灌洗液阳性率高（P<0.05）。共检出12种病原菌，种类以流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌为主。附表。
2.2不同年龄患者的病菌检出率。60岁以上患者的铜绿假单胞菌检出率较高18岁以下患者的流感嗜血杆菌检出率较高
（P<0.05），见表1。
3 讨论
恒温核酸扩增芯片法主要是通过针对靶基因的6个取悦区域设计4对特异性引物因素，通过链置换DNA聚合酶在恒温情况下进行循环阶段，最终形成大小不同的产物[3]。该过程不需要利用模板热变性，温度循环机以及紫外线观察等等步骤，整个检测过程可以在15-60分钟内完成[4]。该方法具有较高的敏感性、特异性，检测方法简单快速，不容易造成污染，自动化程度比较高，试剂的消耗量比较低，病原体的覆盖面比较广，具备快速诊断呼吸道感染性疾病的能力[5]。因此，在检测下呼吸道感染病原体中应用，具有非常大的优势。再者，传统的细菌分离培养流程过于繁琐，期间有一定的污染几率，准确性不够高，因此与恒温核酸扩增芯片法对比，存在更大的缺陷。
综上所述，恒温核酸扩增芯片法在下呼吸道感染病原体检测中应用，效果显著。
参考文献
[1]唐睿珠,罗正琼,徐秋月,等.呼吸道病原体核酸恒温扩增芯片十三联检在下呼吸道感染常见病原体基因中的检测[J].昆明医科大学学报,2017,38(1):8-12.
[2]刘志远,潘健,张婷菊,等.恒温扩增芯片法在下呼吸道病原体检测中的应用[J].检验医学与临床,2017,14(8):1052-1053.
[3]王咏红,郭雅洁,陈玉莹,等.恒温扩增芯片法在儿童下呼吸道感染性疾病中的应用价值评估[J].中国循证儿科杂志,2018,13(3):176-179.
[4]康蓓佩,周磊,付晓蕊,等.恒温扩增芯片法在下呼吸道病原体检测的临床价值[J].国际检验医学杂志,2018,39(22):2767-2770.
[5]陈愉生,林晓红,李鸿茹,等.下呼吸道感染住院患者病原学分析及判别模型的建立[J].中华结核和呼吸杂志,2017,40(12):909-914.
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