摘要：肃南县白银蒙古族乡畜牧兽医工作站以甘肃高山细毛羊为母本，无角陶赛特和南非美利奴羊为父本，通过同期发情、超数排卵和腹腔镜子宫角输精技术生产优质胚胎，并移植至受体羊。经B超检测，99只受体羊中71只妊娠，受胎率达71.72%，高于国内平均水平。结果表明，该技术可加速细毛羊改良和扩繁，提高养殖资源利用率，并通过胚胎移植阻断疫病垂直传播，降低养殖风险。该成果为高海拔地区绵羊高效育种提供了可行方案。该技术可加速细毛羊改良和扩繁，提高养殖资源利用率，并通过胚胎移植阻断疫病垂直传播，降低养殖风险。该成果为高海拔地区绵羊高效育种提供了可行方案。
关键词：胚胎移植,甘肃高山细毛羊,繁殖,应用研究
0引言
1984年肃南县被列为全国细毛羊生产基地，其细毛羊肉是绿色有机产品，品质出众。受市场经济波动、饲养成本上升等因素影响，细毛羊养殖数量逐年下降，对祁连山草原生态保护造成潜在压力。为应对这一现状，肃南县白银蒙古族乡畜牧兽医工作站借助《绵羊体内胚胎生产保存及性控技术体系研究与示范》项目，以无角陶赛特和南非美利奴种公羊为父本，本地高山细毛羊为母本，运用同期发情、腹腔镜子宫角输精等技术获取优质胚胎，并移植到本地细毛羊受体体内。这一举措在细毛羊良种繁育中作用显著，既能加快育种改良、提升繁殖效率，又有助于保护和壮大地方特色畜种资源，推动细毛羊产业发展，提高养殖经济效益。
1材料与方法
1.1种公羊、供体羊及受体羊选择
1.1.1种公羊的选择
挑选体格健壮、结构匀称，头大额宽，胸宽深，背腰平直，四肢粗壮有力，产毛性能优良，密度、细度、长度等指标出色，具有优良的品种特征；种公羊睾丸发育良好、大小适中且左右对称，生殖能力正常，通过实验室检测精液品质优良，精液检测活力高、密度大性欲旺盛，共挑选5只无角陶赛特及3只南非美利奴作为试验用种公羊。
1.1.2供体羊的选择
选择本地品种甘肃高山细毛羊为供体，该品种适应性强，能应对多种气候和饲料条件，适应试验开展地的环境和养殖模式。挑选健康无病，无传染病、寄生虫感染迹象，精神状态良好，采食、反刍正常，体温、呼吸等生理指标稳定。生长发育快、体型良好，羊毛品质优良，年龄在3～4周岁的经产母羊20只。
1.1.3受体羊的选择
挑选精神饱满、体型适中、膘情良好、被毛顺滑、无疾病症状，体温、呼吸等生理指标正常，无传染病史年龄在2～5周岁的本地品种甘肃高山细毛羊经产母羊101只为受体。
1.2饲养管理
1.2.1种公羊饲养管理
保证饲料的营养全面且均衡，在配种前15 d增加蛋白质的供给，只均日饲喂精料1 kg、胡萝卜0.5 kg、鸡蛋0.25 kg、大葱0.5 kg，给予充足饮水。每日驱赶种公羊增加运动量，采精前3 d做好排精，有助于提高精子的质量和数量。所有种公羊试验前2个月完成各类疫苗接种，同时进行布病检测，检测结果均为阴性。在饲养过程中密切观注羊精神、采食及粪便情况，确保羊健康。
1.2.2供、受体羊饲养管理
每日定时定量投喂，精料每天每只0.2 kg，青干草自由采食，给予充足饮水。所有供受体羊试验前2个月进行疫苗接种，同时进行布病检测，检测结果均为阴性。在饲养过程中密切观注羊精神、采食及粪便情况，确保羊健康。要对受体羊进行严格筛选，确保其健康无病、生殖系统正常。
1.3超数排卵、胚胎采集鉴定及移植
1.3.1供体羊处理
供体羊采用孕激素处理法，将含有孕激素的阴道栓（进口硅胶栓）放置在供体羊阴道内并注射维生素A、D、E，持续13 d。这种激素可以抑制供体羊的发情行为。在撤栓时，同时注射孕马血清促性腺激素，来刺激卵泡发育，促使羊群在较短时间内集中发情。精准把控激素使用剂量和时间，使受体羊与供体羊的生理状态同步。
1.3.2受体羊处理
受体羊采用孕激素处理法，将含有孕激素的阴道栓（进口海绵栓）放置在供体羊阴道内并注射维生素ADE，持续12 d。这种激素可以抑制供体羊的发情行为。在撤栓时，同时注射孕马血清促性腺激素、氯前列醇，来刺激卵泡发育，促使羊群在较短时间内集中发情。精准把控激素使用剂量和时间，使供体羊与的受体羊生理状态同步。
1.3.3供体羊超排处理
供体羊在放栓后第10～13天采用递减法注射促卵泡素，此处理方法能够更精准地刺激卵泡生长发育，减少卵巢不良反应。
1.3.4供体羊配种
此次超排供体母羊采用本交、人工授精及腹腔镜子宫角输精3种方式进行配种。第13天下午进行试情自由交配，共有8只母羊受配，剩余12只未发情母羊注射促卵泡素及氯前列醇。第14天早晨进行试情自由交配，未受配的羊进行人工授精。第14天晚上对初次试情自由交配未受配的12只母羊进行腹腔镜子宫角输精，剩余8只进行人工授精。第15天进行自由交配。（此天数全部从放栓第1天开始算起）在配种后，供体羊处于安静、舒适的环境中，避免外界干扰，同时继续观察供体羊的行为和身体状况，为后续的胚胎采集做好准备。
1.3.5供体羊冲胚
供体羊冲胚是胚胎移植过程中的关键环节，待供体羊发情并配种后的19 d（从放栓第1天开始算起），开始冲胚操作。将供体羊进行麻醉后仰卧固定，采用手术法进行冲胚。手术法需在腹部切开小口，找到输卵管和子宫角，把冲胚液注入其中，借助冲胚液将胚胎从卵巢中冲洗出来，收集于器皿内。冲胚液的成分十分关键，包含多种营养物质和缓冲剂，用以维持胚胎在体外的生存环境。完成冲胚后，需在显微镜下仔细检查收集到的液体，挑选出形态正常、发育良好的胚胎，为后续的胚胎移植做准备。
1.3.6受体羊移植
此次胚胎移植采用手术法移植，受体羊术前禁食禁水24 h，以减轻肠胃负担。在其腹部乳房前5～10 cm处，沿腹中线作4～6 cm切口。找到子宫角后，将装有胚胎的移植管轻柔插入子宫角前端1～2 cm处，缓慢推出胚胎，随后缝合肌肉与皮肤，术后注射抗生素并在伤口处喷涂碘伏预防感染。胚胎移植后，受体羊进入妊娠阶段，饲养管理要更加精细。避免其受到惊吓和剧烈运动，防止流产。饲料中增加富含钙、磷等矿物质的成分，满足胎儿骨骼发育需求。
1.3.7早期妊娠B超诊断
移植后51 d利用B超对采用胚胎移植技术受配的受体羊进行早期妊娠诊断。之后每30 d定期进行孕检，监测受体羊的妊娠情况和胎儿发育状况，以便及时发现问题并采取相应措施。
2结果与分析
2.1供体羊处理结果
经前期同期发情处理供体羊20只，发情20只，供体羊同期发情率为100%。
2.2受体羊处理结果
经前期同期发情处理受体羊101只，未发情2只，发情99只，受体羊同期发情率为98.01%。
2.3供体羊冲胚结果
20只供体母羊共计完成冲胚20只母羊，经仔细操作，共收集到冲胚液样本20份。在体视显微镜下对每份样本进行详细检查与胚胎鉴定，结果共获得可用胚胎165枚，其中A级胚胎（形态正常、细胞结构清晰、胞质均匀、分裂球大小一致）132枚，占比80%；B级胚胎（略有缺陷，但不影响后续发育，如胞质轻微不均匀、分裂球大小稍有差异）33枚，占比20%。此外，还收集到未受精卵32枚，退化胚胎45枚。
由表1可知，本次冲胚的平均可用胚胎数8.25枚/只，与同类研究相比，处于较高水平。分析可能影响冲胚结果的因素，超数排卵方案的实施效果总体良好，但部分供体羊个体对激素反应存在差异，导致排卵数量和胚胎质量有所不同。手术操作过程中的熟练程度和对细节的把控，也对胚胎的收集完整性起到关键作用。另外，冲胚液的温度、成分及操作环境的稳定性，均可能对胚胎的活力和质量产生影响。
2.4早期妊娠B超诊断结果
移植后51 d利用B超对采用胚胎移植技术受配的受体羊进行早期妊娠诊断。由表2可知，共有71只受体母羊受孕，受胎率为71.72%，这一试验成果高于国内平均水平。
3讨论与小结
3.1加快改良进程
甘肃高山细毛羊为毛肉兼用型羊品种，通过胚胎移植等技术手段改良，使细毛羊的羊肉品质和产量等关键指标有较大提升。胚胎移植技术能显著加快羊肉质的遗传改良进程。优良肉质性状能快速在群体中扩散。养殖者可以有更多机会筛选出肉质更佳的个体，加快遗传进展。
3.2快速扩繁
细毛羊自然繁殖率相对较低，且妊娠期长。胚胎移植技术突破了这一限制，通过超数排卵技术获取多个胚胎，移植到受体母羊体内，使优良母羊能孕育更多后代。这不仅增加了优秀细毛羊的数量，还能在相同时间内实现更多世代的更替，加快品种改良速度。
3.3提高养殖资源利用率
在细毛羊养殖中，部分具有优良遗传基因的母羊可能因身体状况无法正常妊娠，或因年龄增长繁殖能力下降。通过胚胎移植，可采集这些母羊的胚胎，移植到健康的受体母羊体内，充分利用其优良基因。同时，普通母羊作为受体，也能参与到良种繁育中，提高了细毛羊养殖资源的整体利用效率。
3.4切断疫病垂直传播途径
胚胎移植过程中，可对胚胎进行严格的检疫和检测，有效避免某些传染性疾病的传播。这有助于建立健康的细毛羊种群，保障细毛羊产业的稳定发展，减少因疫病造成的经济损失。
3.5对于甘肃高山细毛羊产业发展的建议
甘肃高山细毛羊是生态功能优且适应“放牧+舍饲”养殖模式的优势畜种，是肃南县发展绿色生态畜牧业的特色畜种，为实现甘肃高山细毛羊产业长远发展，首先，应加大科技投入，推广现代化养殖技术，如同期发情，腹腔镜子宫角输精，胚胎移植等，提高养殖效率和羊品质。其次，要完善产业链，加强羊毛和羊肉深加工，开发高附加值产品。最后，积极打造品牌，通过品牌营销提升产品知名度和美誉度，拓展销售渠道，让甘肃高山细毛羊产业在市场竞争中脱颖而出，实现可持续的繁荣发展。
参考文献
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