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摘要：目的建立HPLC法测定不同产地赤芍药材中芍药苷含量，为评价赤芍药材的内在质量提供依据。方法采用高效液相色谱法，色谱柱：Agilent 5TC-C18②色谱柱（5μm，250 mm×4.6 mm）；流动相采用甲醇-0.05moL/L磷酸二氢钾溶液（40:65）；检测波长为230 nm；流速为1.0 mL/min；进样量为10μL。结果芍药苷的线性范围为0.1033-1.033 mg/mL，浓度与峰面积的线性关系良好（r=0.9998）；平均加样回收率为99.83%，RSD为1.41%
（n=9），18批不同产地赤芍中芍药苷含量为2.55%-4.76%。结论本文检测的样品中芍药苷均符合《中国药典（2015年版）》，其中赤峰地区赤芍药材样品中芍药苷较高。
关键词：不同产地；赤芍；高效液相色谱法；芍药苷
本文引用格式：徐山.不同产地赤芍药材的质量分析[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(45):132-133.
0引言
赤芍药材为毛茛科植物芍药。或川赤芍的干燥根。春、秋二季采挖，除去根茎、须根及泥沙，晒干。性味为性微寒、味苦，赤芍归肝经。具有散瘀止痛，清热凉血的功效。有研究认为赤芍总苷是赤芍药材的主要活性成分，是赤芍质量的评定指标，芍药苷占赤芍总苷比例在75%以上。由于各地生态环境因素不同的影响，各产地的赤芍中芍药苷含量存在差异，有必要进行考察。本文对18个全国不同产地的赤芍药材样品（采收期为秋季采挖）中芍药苷含量进行了测定，为评价不同产地赤芍药材质量提供科学依据，为筛选出优良的赤芍产地和实施GAP奠定重要基础。本次赤芍产地研究选取赤峰、海拉尔、黑龙江、辽宁等四个产地赤芍药材进行研究[1]。
1材料与试剂、仪器
1.1材料赤芍实验样品，为2017年9月采自内蒙古赤峰、内蒙古海拉尔、黑龙江、辽宁的赤芍药材样品，经过鉴定均为毛茛科植物芍药的干燥根。
1.2仪器和试剂。Waterse2695-2489高效液相色谱仪；梅特勒XS105DU分析天平；昆山KQ-300DE型数控超声波清洗器。甲醇、磷酸二氢钾等试剂为分析纯；流动相所用甲醇为色谱纯；实验用水为二次蒸馏水；芍药苷（110736-201741）由中国药品生物制品检定所购买。
2方法与结果
2.1系统适用性试验与色谱条件。高效液相色谱法，液相色谱柱为Agilent 5TC-C18②色谱柱（5μm，250 mm×4.6 mm）；流动相采用甲醇-0.05 moL/L磷酸二氢钾溶液（40:65）；检测波长230 nm；流速1.0 mL/min；进样量10μL。
2.2对照品溶液。取芍药苷对照品放于减压干燥器中，用五氧化二磷干燥36小时至恒重，待干燥完成后，准确称取12 mg芍药苷于25 mL容量瓶中，适量甲醇溶解后，继续用甲醇定容至刻度，即得浓度为0.4862 mg/mL的对照品溶液。
2.3供试品溶液。精密称取赤芍粗粉0.5g置于锥形瓶（具塞）中，精密加入25 mL甲醇，称定其重量，浸泡4小时，然后超声波处理20分钟后，放冷至室温，称定其重量，再用甲醇补足其减失重量，充分摇匀，过滤，取续滤液，得到赤芍供试品溶液。
2.4考察线性关系。按照2.2方法制备芍药苷对照品溶液（2.066 mg/mL），分别精密吸取芍药苷对照品溶液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mL，置于10 mL的容量瓶中，再用甲醇定容。分别吸取10μL到液相色谱仪中检测。以峰面积为纵坐标（Y），浓度为横坐标（X），进行线性回归，计算，得到回归方程Y=1.41775×107X-360368（r=0.9998），标准曲线在0.1033-1.033mg/mL之间线性良好。
2.5稳定性试验。取同一赤芍供试品溶液，于室温下放置0，1，3，6，10，15 h后，按照2.1项下的液相色谱条件检测在不同时间其峰面积RSD为0.76%，由此证明此溶液在15h内稳定。
2.6精密度试验。按照2.1项下的液相色谱条件检测，取芍药苷对照品溶液连续进样8次，检测芍药苷峰面积，计算得RSD值为0.23%，说明仪器的精密度良好。
2.7重复性试验。精密称取赤芍药材粗粉0.5g，共8份，按照2.3项下的方法制备赤芍供试品溶液，按照2.1项计算其含量。结果显示赤芍药材样品中芍药苷平均值为4.40%，RSD值为0.46%，表明本检测方法重复性良好[2]。
2.8加样回收率试验。分别精密称取9份含量已知的内蒙古赤峰市克什克腾旗的赤芍药材样品粉末约100mg，精密称取芍药苷对照品9份，以高、中、低剂量各3份分别加至样品中，按照2.3项下的方法制备赤芍供试品溶液，按照2.1项计算其回收率。
2.9含量测定。按照2.3项下的方法制备赤芍药材供试品溶液，按照2.1项记录其峰面积，见表2。
3结果与讨论
通过对赤芍药材4个不同产地18个样品中芍药苷含量进行分析考察。从检测结果可知，全部样品高于药典标准（含芍药苷不得少于1.8%）。采用SPSS 19.0按照单因素方差分析，赤峰产地赤芍与黑龙江产地赤芍药材中芍药苷含量差异不显著（P>0.05），与其他两个产地赤芍中芍药苷含量存在差异显著（P<0.05）；海拉尔产地赤芍与辽宁产地赤芍中芍药苷含量差异不显著（P>0.05），与其他两个产地赤芍中芍药苷含量存在差异显著（P<0.05）。各产地赤芍样品中芍药苷含量不同，其均值规律为内蒙古赤峰（4.34%）>黑龙江（4.04%）>辽宁（2.94%）>内蒙古海拉尔（2.85%）。说明不同产地的环境、气候等因素对赤芍药材中芍药苷含量有较大影响。
4结论
18个产地的赤芍药材样品在本文检测中都符合《中国药典（2015年版）》，其中赤峰地区赤芍药材样品中芍药苷较高。赤芍药材作为常用药材，检测不同产地的赤芍药材中芍药苷含量，为评价不同产地赤芍药材质量提供科学依据，为筛选出优良的赤芍产地和实施GAP奠定重要基础[3]。
参考文献
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典2015年版一部[S].北京:中国医药科技出版社,2015:158-159.
[2]马双成,邓少伟.赤芍总苷的生产工艺条件研究[J].中草药,1998,29(10):664-667.
[3]陈述.HPLC法测定不同产地赤芍中芍药苷的含量及重金属和残留农药的分析[J].世界中医药,2014,9:1224-1227.
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