SCI论文（www.lunwensci.com）:
摘要：目的探讨血液标本存放时间对血凝检验结果的影响。方法随机选取2018年1月至2019年1月本院检验科健康体检人群的408份枸橼酸钠抗凝血样本，分离血浆，按检验时间顺序平均分成a组（0 h）、B组（6 h）、c组（24 h）、d组（48 h）四组，四组检验样本分别在常温（20~25℃）状态下进行检验，比较不同检测时间血凝结果（Pt、aPtt、fib）的差异。结果（1）48 h组Pt检测值显著高于0 h、6 h、24 h三组，差异显著（P<0.05），24 h以内检测值无明显差异（P>0.05）；（2）相比较于0 h组，6 h组开始aPtt有所延长，24 h、48 h组均显著增高（P<0.05）；（3）4组fib检测结果均保持稳定，没有明显差异（P>0.05）。结论在血样标本采集结束后及时送检，确保在6 h内完成检测是保证检测效果准确性与可靠性的最佳途径。
关键词：血液标本；存放时间；血凝检验
本文引用格式：丁侣霞,蒋勇.血液标本存放时间对血凝检验结果的影响[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(91):21-22.
The Influence of Storage time of Blood Sample on the Result of Blood Coagulation Test
dinG lv-xia,JianG Yong
(Clinical Laboratory,Rudong County Hospital of Traditional Chinese Medicine,Rudong,Jiangsu,China)
ABSTRACT:Objective to investigate the effect of blood specimen storage time on hemagglutination test results.Methods four hundred and eight sodium citrate anticoagulant samples were randomly selected from the health examination population of our hospital from January 2018 to January 2019.the plasma samples were separated and divided into four groups according to the test time sequence:group a(0 h),group B(6 h),group c(24 h)and group d(48 h).four groups of test samples were tested at normal temperature(20~25℃),and the differences of coagulation results(Pt,aPtt,fib)at different detection time were compared.Results(1)PT detection value of 48 h group was significantly higher than that of 0 h,6 h and 24 h group,with significant difference(P<0.05),and there was no significant difference within 24 h group(P>0.05);(2)compared with 0 h group,aPtt of 6 h group was prolonged,and APTT of 24 h and 48 h group was significantly increased(P<0.05);(3)Fib detection results of 4 groups were stable,with no significant difference(P>0.05).Conclusion it is the best way to ensure the accuracy and reliability of the detection results to send blood samples to the hospital in time after the collection of blood samples and to ensure the completion of the detection within 6 hours.
KEY WORDS:Blood specimen;storage time;Hemagglutination test
0引言
凝血实验是临床上广泛开展，反应患者出血和血栓性疾病的一个项目[1]。最常见的凝血实验是PT（凝血酶原时间），APTT（活化部分凝血活酶时间），Fib（纤维蛋白原），用于评估止血系统的病理变化。PT是一种通用的检测外源性凝血途径的筛查实验，包括凝血因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ和X；APTT用于评估内源性凝血途径的通用实验，包括因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ和Ⅻ[2]。PT和APTT反映了多种凝血因子的活性，并且有研究表明运输和存放时间也可能会影响一种或几种凝血因子的失活，从而导致凝血时间的延长[3-4]。Fib是肝脏合成的蛋白质，在凝血过程中转化为纤维蛋白，其测定是诊断可疑性出血和血栓性疾病的重要指标[5]。准确的凝血结果取决于实验室检测过程中的各个阶段，大家都很清楚分析阶段的重要性，但分析前阶段的质量控制往往被忽略[6]，除了采样、运输和离心，样本在实验室的存放时间也是一个重要的分析前变量，是一个值得关注的问题。因此，本实验将选取本院检验科进行健康体检的102例健康志愿者的血样标本进行临床试验，探讨血液标本存放时间对血凝检验结果的影响，以保证临床检测结果的准确性，报道如下所述。
1资料与方法
1.1常规资料来源
血样标本主要选自2018年1月至2019年1月本院检验科进行健康体检的102例健康志愿者，每位志愿者各采集4份（合计408份）血样标本，其中102例志愿者年龄21~50岁，平均年龄（32.5±5.0）岁；按检验时间顺序（0 h、6 h、12 h、24 h）将其分成四组（A组、B组、C组、D组）。纳入标准：（1）无血液、肝脏等严重疾病史及抗凝药物使用史或治疗史者；（2）无血液检验仪器及药物过敏者；（3）知情并签署同意书者。排除标准：（1）高血压、糖尿病、血友病等病史者；（2）有血液检验仪器及药物过敏者；（3）抗凝药物治疗与使用史者。本实验均在不违背医学伦理学相关规定与标准的基础上进行，四组志愿者年龄、性别等常规资料比较均无差异（P>0.05），有可比性。
1.2方法
1.2.1仪器与试剂
仪器：ACLTOP700全自动血凝仪和ACLTOP500全自动血凝仪（均由美国IL公司生产）各1台；试剂：血浆凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）和纤维蛋白原（Fib）检测试剂均由上海东湖仪器试剂科技有效责任公司生产，而质控产品及标准品则由希森美康公司提供。
1.2.2检测方法
实验前均备好足量混合试剂，将血样标本存放室于实验，并保持温度在常温20~25℃，所有患者的血样标本采集均严格按照血浆样本采集流程执行，采集每位志愿者2 mL血液后立即与抗凝剂混合。在序血样标本采集结束后立即将其送至检验科离心（采集后0.5 h内）处理，确保所有血浆样本均处于正常状态，然后分时段进行检验，即0 h、6 h、12 h、24 h各1次。最后计算各血浆样本与不同存放时间点百分比，其中差异百分比=（血浆样本不同时间点检测结果-0 h血样样本检验结果）/0 h血浆样本检验结果×100.00%。
1.3统计学方法
建立Excel数据库，将102例志愿者（血样标本共408份）基线资料、研究数据进行分类、编号及统计后纳入SPSS 21.0软件处理，计数资料采用2检验，两组独立样本，正态分布，均数比较以及总体方差等资料采用t检验，并以（±s）表示，P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
四组PT、APTT、FIB检测结果比较：如表1所示，室温条件下，PT在24 h内无显著差异，均保持稳定（P>0.05）；不同温度对APTT的影响结果见表2，APTT在6 h时开始延长（P<0.05）；Fib是最稳定的参数，其稳定性可达48 h（P>0.05）。
3讨论
通常情况下，血液标本（Blood Preparation）的科学、合理、有效的采集是准确、可靠的获取血液检验标本的前提。若按照时间顺序来看，其基本步骤包括检验申请、被采集者准备、样本采集、样本运输等。凝血参数PT、APTT、Fib通常包括在临床和临床前的安全性研究中，以评估异种生物对凝血的内在或外在途径的影响，凝血标本的稳定性取决于多种变量，如使用的血液采集系统、样本储存条件以及用于样本分析的仪器-试剂组合[7-8]，据《细胞及血液样本采集操作指南》报道，目前确保血样标本的准确性、可靠性最有效的途径就是保证血样标本在采集后2 h内完成检测，然而在实践中分析的延迟有时是不可避免的，因此有必要评价储存温度和储存时间对结果的影响。
目前，国内学者多从统计学结果对血样标本存放时间与血凝检验结果的关系进行研究与分析[9]。有统计学分析明显指出，大部分血样标本在采集后及时存在6 h左右，其结果与0 h的检验结果的误差也保持在4.0%左右[10]。从我们的实验中得出的结果也表明，PT在收集后的6 h均可以被分析而无显著差异，同样，如果立即对血浆进行分析或存储时间不超过6 h，APTT值最可靠，而纤维蛋白原水平检测可在收集后延长至48 h。不同研究中凝血参数稳定性的差异可能归因于不同的群体、研究设计、试剂、仪器和收集容器等，然而所有关于人类凝血参数稳定性的发现或多或少与我们的发现相似[11-12]。
综上所述，本研究的结果表明，在室温条件下，PT和APTT在收集后6 h内均可以进行分析，但效果不佳，纤维蛋白原检测可延长至48 h，所以在血样标本采集结束后及时送检，确保在6 h内完成检测是保证检测效果准确性与可靠性的最佳途径。
参考文献
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