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摘 要：目的 探讨浓缩血小板制备参数的确认方法，提高浓缩血小板制品中血小板数量，提高血小板制品质量。方法 浓缩血小板制备方法采用富血小板血浆法：分 2 程离心，先分离出富含血小板血浆，再制备出血小板悬液。采用逐步推进法来确定离心时间和离心力，每份标本离心后及时检测血小板计数。结果 我站大容量冷冻离心机Thermo Fisher 第一程离心时间为10 min；离心转速2000 r/min，第二程离心时间为9 min；离心转速3200 r/min。在设定的检测范围内未出现溶血现象和血小板功能损伤。结论 确定大容量冷冻离心机离心转速和离心时间能提高浓缩血小板制品中血小板数量。
关键词： 富血小板血浆；浓缩血小板；离心力
本文引用格式：李霞, 孙建东 . 浓缩血小板制备参数确认的方法探讨 [J]. 世界最新医学信息文摘,2018,18(74):163.
0引言
浓缩血小板是在机采血小板不能满足临床供应时采用的权宜措施，特别是中小型血站，使用较多。大容量冷冻离心机离心参数的确认非常重要 [1]。新进购或使用两年以上的离心机应进行离心时间和离心转速的确认。
1材料与方法
1.1标本来源。使用去白细胞滤器血袋，采自健康献血者， 过滤白细胞后的合格血液。
1.2仪器与试剂
1.2.1大容量冷冻离心机（Thermo Fisher SCIENTIFIC）。
1.2.2血细胞分析仪（SYSMEX）。
1.2.34040 半自动生化分析仪（北京瑞尔达）。
1.2.4血细胞比积测定管（玻璃质地，容量 1 mL，刻度长10 cm，分 10 大格，每大格又分 10 小格）。
1.3方法。采用富含血小板血浆制备法。
1.3.1 确定第一程离心时间和转速。暂取离心时间 5 min， 转速设置为 500、1000、1500、2000、2500、3000、3500、4000 r/min，分别离心，测量血浆容积（mL）。绘制曲线， 离心转速为横坐标，血浆容量为纵坐标。根据血浆容量增长趋势，找出最佳离心时间。取值意向：①曲线斜率有明显变化的转折点（再延长离心转速，已不能明显增加容量）；② 取未形成白膜层的离心转速（如白膜层形成，说明相当数量的血小板已嵌入白膜层）。选取最佳离心转速（2000 r/ min），设定离心时间（min）分别为 2.5、5.0、7.5、10.0、12.5、15.0、17.5、20.0，分别进行离心，测量血浆容积（mL）。 绘制曲线，取离心时间为横坐标，血浆容量为纵坐标。根据血浆容量增长趋势，找出最佳离心转速。
1.3.2 确定第二程离心转速和时间。将第一程分离出的富含血小板血浆在 3500 r/min 条件下：①较高的理论值；②未损伤血小板），设置 2.5、5.0、7.5、10.0、12.5、15.0、17.5、20.0 min 分别离心，逐一测量比积管内血浆中血小板含量， 换算成血小板数量。绘制曲线，横坐标为离心时间，纵坐标为血小板含量。根据最下层血浆（80 mL）血小板含量增加的趋势，找出最佳离心时间。取值意向：①曲线斜率有明显变化的转折点（再延长时间，已不能明显增加最下层血浆中血小板含量）。②下沉部分不能有血小板凝集（显微镜观察）。
1.3.3 相关检 测。①血小板计数采用血细胞分析仪（SYSMEX）。②血浆微量血红蛋白检测采用 4040 半自动生化分析仪（北京瑞尔达），试剂盒为北京瑞尔达公司。
2结果
3讨论
大容量冷冻离心机离心效果主要由几个关键性因素决定，包括离心转速、离心时间、温度、加速度等，其中，离心转速和离心时间，影响效果更为直接；其他因素可变性较小。确定初次离心时间为 5 min 的依据：①悬浮红细胞制品红细胞比容标准为 0.35-0.60（GB），离心时间 5 min 以下， 不易达到要求；②应尽量缩短制备时间。因制备方法采用富血小板血浆法，第二程离心理论上应转速高，时间稍长，可以最大限度的收集血小板。新进购离心机在设置程序时，转速和时间是两个决定性的因素，直接决定血小板制品的数量能否达到最高值。新购进的离心机，即便是同一型号的，参数设置一致，离心功能也不尽相同（因为摩擦阻力不同）， 需要确定离心参数 [2]。同时建议，使用两年以上的、或离心效果不佳的离心机也应确认离心参数。
参考文献：
[1]郭 永 建 .《血 站 技 术 操 作 规 程》导 读 [J]. 中国 输 血 杂志,2012,25(4):401-404.
[2]傅钰斌 , 汤静儿 , 李锦城 , 等. 影响献血者捐献机采血小板的相关因素分析[J]. 中国输血杂志 ,2017,30(4):406-408.
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