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摘要：目的分析ABO疑难血型的血清学检测及配血处理，以便更准确的鉴别ABO血型，保障临床输血安全。方法以我院2016年2月至2018年10月出现的28例ABO血型正反定型不一致的病例为分析研究对象，分别采取了全自动血型和交叉配血分析仪以及试管法进行了鉴定，根据血清中的不规则抗-A抗-B和吸收放散等试验来完成鉴定。结果经鉴定28例ABO亚型中共有6例A亚型、7例AB亚型、11例B亚型、4例B（A）型。结论只有准确的鉴定ABO血型，才能保障患者进行安全的输血，同时还可以根据血清学的检测结果来制定相对应的输血治疗计划。
关键词：疑难血型；ABO血型；血清学检测；输血安全
本文引用格式：王鹏槐.ABO疑难血型的血清学检测及配血处理分析[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(64):206-207.
0引言
在为患者进行输血之前首先要鉴定其自身血型，对献血者也要进行ABO和RhD血型的检测，这是保障输血安全的重要前提。但在临床中因为血型抗原非常复杂多样，还有诸多其它因素的干扰，所以经常会出现正反定型不同的现象，对血型的判断带来困难，让医护人员颇为苦恼，也对患者带来不利影响[1]。面对这一现象，以我院最近出现的28例ABO血型正反定型不同病例为研究对象，采用了多种血清学检测方法，并取得了实质性进展，完成了ABO血型的检测工作，详情如下。
1资料与方法
1.1一般资料。以我院2016年2月至2018年10月出现的28例ABO血型正反定型不一致的病例为分析研究对象，因年龄和不规则抗体等原因导致的正反定型不同病例已被排除在外[2]。对所有患者均采集了2.5 mL的血液，乙二胺四乙酸二钾抗凝，以3500 r每分钟离心5分钟。
1.2试剂。单克隆的抗-A和抗-B试剂、ABO血型反定型试剂红细胞、抗-H均来自于同一家血液生物医药公司。抗-AB和人源广谱抗-A以及抗-B血清都是本院自制。ABO和RhD血型定型检测标准也都出自于同一个公司。
1.3方法
1.3.1鉴定步骤：采用微柱凝集法来鉴定患者的ABO或RhD血型，如果ABO血型的正反定型不同，就采用试管法来复核。
（1）处理血液样本。对需要鉴定的血液离心出其血浆，取压积RBC再用0.9%的生理盐水清洗3次，谨慎操作并制成3.5%左右的红细胞悬液。
（2）加样。正定型：拿出两支干净的玻璃试管，事先进行标记处理，分别加入抗-A和抗-B各一滴，将配好的患者RBC悬液滴入，一滴便可。反定型：先拿出四支干净的玻璃试管，分别做标记处理，每支滴入患者两滴血浆，之后再分别加入A细胞、B细胞、O细胞和自身的红细胞各一滴，轻轻摇晃以便均匀混合。
（3）离心处理。每分钟1000 r离心1分钟，之后观察其结果。若是符合判别标准就可判定其血型，若是不符合就需要做进一步的鉴定。
1.3.2ABO亚型鉴定
（1）正定型和反定型以及抗-H。正定型：拿出两支干净的玻璃试管，标记处理后分别加入人源抗-A和人源抗-B各一滴，再分别加入患者的RBC悬液一滴。反定型：增大A细胞和B细胞管的血清量，视情况可放置4℃，并孵育10分钟来增强反应，再用O细胞和自身的红细胞作为对照。抗-H：拿出三支干净的玻璃试管，标记处理后分别加入一滴抗-H试剂，再分别加入患者的RBC悬液和B细胞以及O细胞各一滴。完成之后，每分钟1000 r离心1分钟，观察其结果并进行判定。
（2）吸收试验。用0.9%的生理盐水清洗患者的压积红细胞，以1 mL为标准，最少需要清洗三遍，清洗之后要尽可能清除所有的生理盐水，在清洗后的红细胞里加入同样多的人源抗-A或者抗-B血清，让红细胞和抗体充分的混合，放置在4℃环境下孵育，视情况可孵育1小时或者是一晚。观察到抗体已被红细胞充分吸收之后再进行离心，每分钟3400 r离心2分钟；选用4℃的生理盐水冲洗红细胞，最少清洗6遍，清洗时一定要谨慎操作，操作时间不要超过12分钟。与此同时用O细胞作参照实验，步骤一致。
（3）热放散。在清洗后的红细胞试管中加入同样多的生理盐水，放置进56℃的水浴箱，同时轻摇1分钟再静置9分钟。之后离心并取出所有的上清放散液放于Ac（Bc）试管中，再分别加入相对应的Ac（Bc）红细胞各一滴，每分钟1000 r离心1分钟，之后观察其结果。
（4）唾液血型物质检测。采集患者的唾液备用，拿出三支干净的玻璃试管，做标记处理，分别标记为抗-A和抗-B以及抗-H，将唾液分别滴入三个试管，再分别加入50μL的修正血清，该修正血清已做稀释处理，在室温下孵育5分钟；在每个试管中分别滴入与50μL相对应的ABO标准红细胞悬液，轻摇均匀混合后室温下孵育45分钟左右，每分钟
3400 r离心15秒，之后观察其结果。
2结果
经鉴定28例ABO亚型中共有6例A亚型、7例AB亚型和15例B亚型，这些亚类型和建议输注红细胞的类型分别为：A 2（洗O）、A 3（A/洗O）、Ael（洗O）、B 3（B/洗O）、Bel（O）、Bx（洗O）、B(A)（洗B/洗O）、AB 3（AB/洗A、洗O）和ABel（AB/洗A、洗O）。
3讨论
现代临床输血中很关键的一步就是进行ABO血型鉴定，只有非常准确的鉴定出了ABO类型，才能保障患者的输血安全，这是必然的前提条件。疑难血型在判定时一旦出现了失误，就会导致患者在输血时产生溶血反应，因而可能引发急性的肾功能衰竭甚至是威胁患者生命[3]。ABO血型检测中若是发现了正反定型不同的现象，就预示着可能存在亚型情况，血清学中表现为患者的红细胞和抗-A和抗-B反应非常微弱，甚至毫无反应，其血清中可能含有不规则的抗-A1和抗-B。出现ABO亚型的现象会为血型判定带来一定难度，若其血清中含有不规则的抗-A1和抗-B还可能产生交叉配血不合的现象。本次研究的28例中就有8例含有不规则抗-A1和抗-B。一些亚型血清里含有的不规则抗-A1和抗-B非常微弱，有时会产生漏检的可能，如果一旦发生漏检，就极有可能会产生输血反应，为患者带来潜在的危害。
检测出红细胞上的微弱抗原和血清中含有的不规则抗提是ABO亚型血清学检测的重点，可以依据血清学的检测结果来制定相对应的输血治疗计划，以此来防范溶血性输血反应的发生，也能避免无效输血。患者若为A亚型，如患者的血清中不含有-A1抗体，拿在输血时应该优先选择A型，其次可以选择O性清洗红细胞；血浆或者含有血浆成分的血液制品也要优先选择A型，其次可以选择AB型，比如A3，如果血清里含有-A1抗体，红细胞成分就可以选择O型清洗红细胞，而血浆或者含有血浆成分的血液制品就可以选择AB型。患者若为B亚型，其输血的原则与A亚型相同。如果AB亚型患者的血清里含有不规则-A和抗-B，优先选择O型清洗红细胞，其次可以选择清洗A，比如本次研究中的ABel，其血清中不含有不规则抗体，红细胞就可以优先选择AB型，其次可以选择O型清洗红细胞。凡是亚型，在输入血小板的时候都要选择与其相对应的正常血型[4-5]。临床中会遇到一些ABO亚型的重病患者，想要准确鉴定其血型需要较长的时间，鉴定步骤和清洗红细胞都需要更多的时间，如果遇到患者生命出现了垂危现象，就需要立即采取应急处理。输血的相关技术规范中明确指出了输血三大原则，即自身输血和同型输血以及配合型输血。所以在面临紧急情况时为了确保配血吻合所采取的应急处理能够抢救患者的生命，与临床抢救规则相一致。非紧急情况下，只有准确的鉴定ABO血型，才能保障患者进行安全的输血，同时还可以根据血清学的检测结果来制定相对应的输血治疗计划。
参考文献
[1]孙晓琳,关晓珍,于洋,等.36例ABO血型亚型检测及血清学分析[J].临床输血与检验,2012,14(3):215-217.
[2]兰炯采,陈静娴,马红丽,等.推荐ABO疑难血型三步分析法[J].中国输血杂志,2010,23(3):318-320.
[3]屈林,李景和,刘凤霞．ABO抗原减弱所致疑难血型的原因分析及鉴定方法[J］．中国输血杂志,2010,23(9):706-708.
[4]余中清,胡丽华．ABO疑难血型鉴定与临床输血的研究[J].临床血液学杂志，2010，23(2):98-101.
[5]向东,刘熙.上海地区中国人群中ABO亚型的研究[J].中国输血杂志,2006,19(1):25-26.
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